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下图是制备抗埃博拉病毒VP40蛋白的单克隆抗体的过程。请回答下列问题: (1)过...

下图是制备抗埃博拉病毒VP40蛋白的单克隆抗体的过程。请回答下列问题:

(1)过程①中选用EcoRⅠ和XhoⅠ两种限制酶切割的优点是_____________________

(2)过程②中首先需要处理大肠杆菌,使其处于感受态,VP40基因进人大肠杆菌后维持稳定并表达的过程称为____________________________________

(3)与植物原生质体融合相比,过程④特有的方法是用_____________处理。通常在选择培养基中需加入抗生素,目的是____________________________。制备单克隆抗体时,先用特定的选择性培养基进行筛选,获得____________________________,该细胞的特点是__________________________________________。选择培养基上存活的杂交瘤细胞产生的抗体___________(填“是”或“不是”)单克隆抗体。然后对上述细胞进行抗体检测,选取____________________________的细胞克隆化培养。

(4)图示过程应用的生物技术有_____________________________。(至少答出两种)

 

防止目的基因自身环化,防止目的基因与载体反向连接 转化 灭活的病毒 防止培养过程中的杂菌污染 杂交瘤细胞 既能分泌专一的抗体、又能无限增殖 不是 能产生特定抗体(或能产生抗埃博拉病毒VP40抗体) 基因工程、动物细胞培养、动物细胞融合 【解析】 制备抗埃博拉病毒VP40蛋白的单克隆抗体的过程,①是目的基因与运载体结合,②是将目的基因导入受体细胞,③过程表示给老鼠注射特定的抗原蛋白:VP40蛋白引起小鼠的特异性免疫,产生特定B淋巴细胞,④过程是动物细胞融合过程,据此答题即可。 (1) 过程①中选用EcoRⅠ和XhoⅠ两种限制酶切割可以使目的基因的两端获得不同的粘性末端,所以这样处理的优点是防止目的基因环化。 (2) 过程②是将目的基因导入受体细胞,此过程首先需要用Ca2+处理大肠杆菌,使其处于感受态,VP40基因进入大肠杆菌后维持稳定并表达的过程称为转化。 (3) 与植物原生质体融合相比远离基本相同,植物原生质体融合常用物理方法和化学方法,动物细胞融合常用的诱导因素有聚乙二醇和灭活病毒及电激,所以过程④特有的方法是用灭活的病毒处理.通常在选择培养基中需加入抗生素,目的是防止培养过程中的污染.选择培养基上存活的杂交瘤细胞,还需要进行克隆化培养和抗体检测,经过多次筛选才可以获得.所以选择培养基上存活的杂交瘤细胞产生的抗体不是单克隆抗体。 (4) 图示过程应用的生物技术有:①是目的基因与运载体结合,②是将目的基因导入受体细胞,③过程表示给老鼠注射特定的抗原蛋白:VP40蛋白引起小鼠的特异性免疫,产生特定B淋巴细胞,④过程是动物细胞融合过程。
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科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛。如果要加速转基因奶牛的繁育,可以对此转基因奶牛进行克隆(如图所示)。请结合图示回答下列问题:

(1)要想让奶牛的乳汁中含有人生长激素,需构建表达载体时在生长激素基因编码区前加_______________

(2)在进行细胞培养时,要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理,形成单个细胞,这个过程中需要利用__________酶处理。用于核移植的供体细胞,一般都选用传代10代以内的细胞,原因是_________________

(3)在进行原代培养时,细胞增殖表现出_____________________________等特点。

(4)将进行培养的供体细胞注人去核的卵母细胞中,去除卵母细胞细胞核的目的是_________

(5)上述动物细胞工程中涉及的技术有__________以及胚胎移植技术。转基因奶牛的克隆成功,说明了动物______________具有全能性。

 

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下图所示为科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育“番茄一马铃薯”植株的过程。请回答下列问题:

(1)①②过程使用了____________酶,以获得植物的原生质体。

(2)过程③在化学药剂______________________的作用下会发生植物原生质体的融合,融合后的原生贡体会再生出细胞壁,新的细胞壁的产生与细胞内____________________(细胞器)有关。

(3)过程⑤表示__________,过程⑥表示__________,细胞分化的根本原因是__________________________

(4)过程⑤⑥⑦表示的细胞工程技术是____________,通过该技术可以获得脱毒苗,培养过程常常选用______________________进行培养。

(5)植物体细胞杂交的研究在__________________方面,取得了巨大突破。

 

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下图表示利用基因工程培育抗虫马铃薯的过程。请据图回答下列问题:

(1)为在短时间内获得大量目的基因,可用PCR技术进行扩增,其原理是________________________________

(2)若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是一一,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是一一,那么在①过程中,应用限制酶______________________切割质粒,用限制酶___________________切割抗虫基因,才能至少保留一个标记基因。

(3)启动子是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是_____________________别和结合的部位。

(4)通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有___________________的培养基上,若大肠杆菊能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒,反之则说明没有导入。

(5)将目的基因导人马铃薯细胞使用了农杆菌转化法,要用___________处理土壤农杆菌,使之转变为感受态,然后将它们在缓中液中混合培养以完成转化过程。目的基因导入马铃薯细胞后,是否可以稳定存在和表达,要通过检测与鉴定。在分子水平上检测马铃薯的DNA上是否插入了目的基因的方法是_______________

__________________________________________________

 

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如图转基因山羊C为乳腺生物反应器,可生产药用蛋白,具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点;转基因抗虫棉D抗虫效果明显,无环境污染。下列说法错误的是

A. ①过程表示目的基因的获取

B. 转基因抗虫棉D是否抗虫需要进行抗虫接种检测

C. 转基因山羊C乳腺细胞以外的其他细胞不含目的基因

D. 转基因山羊C只在乳腺细胞中表达来自人的目的基因

 

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下列属于动物细胞培养与植物组织培养区别的是

A. 动物细胞培养所用的培养基的成分与植物的不相同

B. 动物细胞培养、植物组织培养均需在无菌条件下进行

C. 动物细胞培养过程中可发生基因重组,而植物组织培养不能

D. 动物细胞培养需控制温度,而植物组织培养不需要

 

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