Question

制备固定化酵母细胞的实验步骤是：酵母细胞的活化→配置CaCl₂溶液→配置海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。请根据材料回答下列问题：

（1）这种固定酵母细胞的方法属于_____法，一般固定化酶时不采用这种方法，原因是__________。

（2）活化就是让处于休眠状态的微生物恢复至________状态．该实验中需要将休眠状态的酵母菌加入到_________中进行活化。

（3）加热溶解海藻酸钠时需注意用____加热，然后将溶化好的海藻酸钠溶液________________后，才能和酵母混合均匀。此外海藻酸钠的浓度对本实验结果影响较大，若浓度过高，则______________，。

（4）观察利用固定化酵母细胞发酵的葡萄糖溶液，根据_______可对发酵效果进行简单的评价。

Answer

包埋 酶分子小，容易从包埋材料中漏出 正常的生活 足够大的容器 小火间断加热 冷却至室温 不易形成凝胶珠 是否有气泡产生、是否有酒味

【解析】

1、固定化酶的优点有：可多次使用、便于产物分离、提高产品质量等，细胞多采用包埋法固定化。这是因为细胞个大，而酶分子很小；个大的细胞难以被吸附或结合，而个小的酶容易从包埋材料中漏出。

2、在制备固定化酵母细胞过程中，溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温，才能加入已活化的酵母菌，原因是防止高温杀死酵母菌。

（1）分析实验步骤可知固定化细胞的方法属于包埋法，由于酶分子小，容易从包埋的材料中漏出，因此一般固定化酶时不采用这种方法。
（2）活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复至正常生活状态。活化前应选择足够大的容器，因为酵母细胞活化时体积增大。
（3）加热溶解海藻酸钠时需注意用小火间断加热，然后将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温后，才能和酵母混合均匀，以免高温使酵母菌失去活性。此外海藻酸钠的浓度对本实验结果影响较大，若浓度过高，则不易形成凝胶珠，刚形成的凝胶珠需要在氯化钙溶液中浸泡一段时间，其目的是使凝胶珠形成更稳定的结构。

（4）观察利用固定化酵母细胞发酵的葡萄糖溶液，可通过看是否有气泡产生、闻是否有酒味的方法对发酵效果进行简单的评价。