Question

为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：

（1）通常培养基采用____________法灭菌；在制备固体培养基的倒平板操作时，待平板冷却至_______左右时，应将平板倒过来放置，这样做的目的是___________________________。

（2）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是____________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为___________。

（3）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过___________灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是__________________。

（4）示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

（5）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。

Answer

高压蒸汽灭菌 50℃ 防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染 检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×107 灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 B 溶解氧 营养物质

【解析】

本题是对微生物实验室培养过程中对实验用品进行灭菌常用的方法及检测培养基灭菌是否彻底的方法、估算样品中菌株数的方法、微生物常用的接种方法和具体操作步骤的综合性考查，回忆和梳理相关知识点，尤其是一些实验的细节，据此答题。

（1）微生物培养过程应该进行无菌操作，配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌；倒平板操作的最适温度为培养基冷却至50℃左右，倒平板的作用是防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。

（2）为了检测培养基灭菌是否彻底，应该取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间。根据题意分析，3个平板的菌落数分别是39、38和37，且稀释了100倍，体积为0.1mL，因此每升水样中的活菌数=（39+38+37）÷3÷0.1×100×1000=3.8×107个。

（3）在平板划线法分离菌种的过程中，对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌；在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落。

（4）据图分析，图中A表示平板划线法，B表示稀释涂布平板法。

（5）根据题意分析，振荡培养不仅提高了培养液中溶解氧的含量，还可使菌体与培养液充分接触，这样可以提高营养物质的利用率，使细菌生长速度加快。