Question

某同学将土壤浸出液涂布在选择培养基上分离出分解尿素的细菌，以下操作错误的是（   ）

A. 首先需要用无菌水对样液进行梯度稀释，以得到由单个细菌繁殖而成的菌落

B. 接种完成后，平板放入培养箱中培养时需要倒置

C. 将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上分离出分解尿素的细菌，该过程是否无菌操作对实验影响很大

D. 若在培养基中加入酚红指示剂，培养基上会长出带有红色环带的菌落

Answer

C

【解析】

从土壤中分离出能分解尿素的细菌的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株；尿素分解菌产生的脲酶能够将尿素分解为氨，使酚红指示剂呈红色，用加入酚红指示剂的培养基中可筛选出分解尿素的细菌。

A. 为防止土壤浸出液浓度过高，难以获得单菌落，要将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，A正确；

B. 接种完成后，平板放入培养箱中培养时需要倒置，以防止污染，B正确；

C. 选择培养基是根据要培养的微生物的代谢特点配制的，一般的杂菌在其中很难生存，所以是否无菌操作对土壤中特定微生物的分离影响不大，C错误；

D. 分解尿素的细菌能合成脲酶，将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若出现红色的环带的菌落，说明其为分解尿素的细菌，D正确。