Question

人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值，只能从血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。

(1)为获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取________合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框内标出另一条引物的位置及扩增方向__________。

(2)启动子通常具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是________。

A.人血细胞启动子          B.水稻胚乳细胞启动子

C.大肠杆菌启动子          D.农杆菌启动子

(3)利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需添加酚类物质，其目的是_______________。

(4)人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性。与途径Ⅱ相比，选择途径Ⅰ获取rHSA的优势是_____________________。

(5)为证明rHSA具有医用价值，须确认__________________________。

Answer

总RNA （或mRNA） B 吸引农杆菌移向水稻受体细胞，有利于目的基因成功转化 水稻是真核生物，具有膜系统，能对初始rHSA多肽进行高效加工 rHSA与HSA的生物学功能一致

【解析】

由图可知，途径Ⅰ是将人血清白蛋白基因与运载体结合导入农杆菌中，借助农杆菌感染水稻受体细胞，将目的基因导入水稻细胞中，并经过植物组织培养获得转基因水稻，人血清白蛋白基因在水稻的胚乳细胞中表达形成人血清白蛋白。途径Ⅱ是将人的血清白蛋白基因与运载体结合后导入大肠杆菌，借助大肠杆菌繁殖速度快的特点，可在大肠杆菌中获得大量的人血清白蛋白。

（1）为获取HSA基因， 首先需采集人的血液，提取mRNA通过反转录法合成总cDNA，然后以cDNA为模板，采用PCR技术扩增HSA基因。由于DNA两条链是反向平行的，复制时也是方向相反的，如图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向，则另一条引物位于另一条链的相反一端。如图所示。

（2）启动子是RNA聚合酶的结合位点，能启动基因的转录，若构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择水稻胚乳细胞启动子才能使目的基因在胚乳细胞中特异性表达。故B符合题意，ACD不符合题意。

（3）利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需添加酚类物质，其目的是吸引农杆菌移向水稻受体细胞，有利于目的基因成功转化。 
（4）由于大肠杆菌为原核生物，无生物膜系统，而水稻为真核生物，具有生物膜系统，故在合成rHAS时，与途径Ⅱ相比，选择途径I获取rHSA的优势是：水稻是真核生物，具有膜系统，能对初始rHSA多肽进行高效加工。 
（5）为证明rHSA具有医用价值，需对基因工程的产物进行鉴定，即确认rHSA与HSA的生物学功能一致。