Question

紫茉莉的花色受核遗传物质控制,基因型为RR、rr的紫茉莉分别开红花与白花，而基因型为R、r同时存在开粉红色花。紫茉莉枝条的颜色是由细胞质中质体颜色决定的：绿色枝条叶肉细胞中含有叶绿体；白色枝条的叶肉细胞中只含白色体；花斑色枝条有的细胞只含叶绿体，有的只含白色体，有的既含有叶绿体又含白色体。从绿色白花紫茉莉的绿叶上取一些叶肉细胞，再从花斑色红花紫茉莉的白色枝条上取一些叶肉细胞，去掉细胞壁后，用诱导剂让其融合，再利用植物组织培养技术获得紫茉莉幼苗。

（1）首先将所取叶肉细胞，用_____________去掉细胞壁，获得原生质体。

（2）获得原生质体后，需要对其活力进行检查，下列哪个实验最合适（_____）

A．观察原生质体的结构是否完整    B．观察细胞质的流动

C．观察细胞有丝分裂                 D．观察叶绿体数目的多少

（3）一般在培养基上培养24～48小时后，大部分原生质体已再分生出细胞壁。可以取样，利用25％的蔗糖溶液以及其他用具，通过______________________实验来鉴别细胞壁是否已经再生。

（4）两两融合后，可出现______种融合细胞，若用融合细胞进行组织培养，已知2,4-D常用于愈伤组织的诱导,对形态的发生有一定的抑制作用。为促进愈伤组织再分化,在配制分化培养基时需______ (填“升高”“保持”或“降低”)2,4-D的浓度。理论上讲，经过以上培养发育成的后代的枝条颜色是__________________，控制花色的基因型依次是__________________。

Answer

纤维素酶和果胶酶 B 观察植物细胞的质壁分离和复原 3 降低 绿色、白色、花斑色 rrrr、RRRR、RRrr

【解析】

植物体细胞杂交过程中，需要先用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体，然后采用物理或化学方法诱导两种植物的原生质体融合，进而形成杂种细胞，再通过植物组织培养的方法将杂种细胞培养成杂种植株。

（1）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所取的叶肉细胞，可用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁，获得原生质体。

（2）获得原生质体后，需要对其活力进行检查，由于原生质体的活力与细胞质的流动性有关，细胞质流动越快，代谢越快，原生质体的活性越大，综上所述，B符合题意，ACD不符合题意。故选B。

（3）由于存在细胞壁的成熟植物细胞可在高浓度的蔗糖溶液中发生质壁分离现象，所以若要鉴别原生质体是否已再生出细胞壁，可以取样，利用25％的蔗糖溶液以及其它用具，通过观察质壁分离及复原实验来鉴别。

（4）如果只考虑细胞两两融合，可出现从绿色白花紫茉莉的绿叶上取的叶肉细胞的自身融合细胞、从花斑色红花紫茉莉的白色枝条上取的叶肉细胞的自身融合细胞以及两种不同细胞的融合体，所以共有三种两两融合的细胞。由题意可知，2,4-D对形态的发生有一定的抑制作用，即2，4-D会抑制愈伤组织的再分化，所以在配制分化培养基时需降低2，4-D的浓度。绿色枝条上所取的叶肉细胞只含叶绿体，自身融合的细胞发育成的枝条为绿色，花斑色枝条有的细胞只含叶绿体，有的只含白色体，有的既含有叶绿体又含白色体，所以取自花斑枝条的叶肉细胞自体融合以及与绿色枝条上所取的叶肉细胞融合的杂种细胞的后代有的细胞只含叶绿体，有的细胞只含白色体，而有的细胞既含叶绿体又含白色体，故由融合细胞发育成的枝条有绿色的、有白色的、还有花斑色的。由于白花的基因型为rr，红花的基因型为RR，所以三种融合细胞的基因型为rrrr、RRRR、RRrr。