Question

我国饮用水卫生标准规定每毫升水样中细菌总数不得大于100个，大肠杆菌不得检出。某兴趣小组为测定本地自来水中的细菌总数和是否有大肠杆菌，进行了如下实验：

①分别配制营养琼脂培养基和伊红美蓝培养基，灭菌。

②取水样。

③先测定甲项指标：用灭菌吸管吸取1 mL水样，涂布到营养琼脂培养基中；置于37 ℃培养24 h后进行菌落计数。另设一个不加水样的空白对照组。

④采用伊红美蓝培养基用滤膜法测定乙项指标。回答下列问题：

（1）步骤②取水样前应先将自来水龙头用火焰灼烧3 min，目的是__________。

（2）步骤③测定的指标甲是_____。步骤④测定乙项指标，主要观察滤膜上是否会出现_____色菌落。兴趣小组认为合格的自来水中细菌数量很少，担心检测不到，因而将取得的水样先加入到无琼脂的营养培养液中培养一段时间后，再稀释涂布平板计数。这样操作获得的数据_________（填“可信”或“不可信”）。理由是___________________________。

（3）如果我们要分离大肠杆菌中的一种蛋白质，凝胶色谱法是一种有效方法，其原理是根据蛋白质的_______________________来进行分离的。除此之外，我们也可以采用电泳的方法来分离蛋白质，其原理是依据蛋白质分子___________________的不同来进行分离。

Answer

灭菌 细菌总数 黑 不可信 细菌会在营养培养液中大量繁殖，其数量不能真实反映水样中原有的数量 相对分子质量的大小 带电性质的差异、本身大小、形状

【解析】

稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内．经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数．此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数，故又称活菌计数。

（1）步骤②取水样前应该先将自来水用火焰灼烧3min，目的是灭菌，防止水龙头携带的细菌混杂在所取的水样中。

（2）步骤③测定的指标甲是细菌总数。水样涂布前不需要稀释的原因是自来水中的细菌数量很少。步骤④测定乙项指标，主要观察滤膜上是否出现黑色菌落。兴趣小组将取得的水样先加入到无琼脂的培养液中培养一段时间后在进行涂布平板计数，得出的结果不可信，原因是细菌会在营养培养液中大量繁殖，其数量不能真实反映水样中原有的数量。

（3）凝胶色谱法分离蛋白质的原理是根据蛋白质的相对分子质量的大小来分离的。而电泳方法分离蛋白质的原理是依据蛋白质分子带电性质的差异、本身大小、形状的不同来分离。