Question

豆浆是深受中国百姓喜爱的饮品，但易变质，保质期较短。科研人员对变质豆浆中的腐败细菌进行分离，并研究了乳酸链球菌素（多肽，天然食品防腐剂）对腐败细菌的抑制效果，为生产豆浆时优化保质方法提供依据。主要研究过程如下：

①豆浆变质处理：将2种市售豆浆A、B和自制豆浆在无菌操作台上分别装入已灭菌的250mL三角瓶中，密封、37℃条件下放置7d后，豆浆发生变质。

②腐败细菌的初步分离和计数：取变质的豆浆在无菌条件下接种到细菌培养基上，培养一段时间后，统计各培养基上菌落种类和数量。结果如表：

细菌序号	菌落特征	菌落直径/mm	菌落数/个
豆浆A	豆浆B	自制豆浆
S1	表面有白色绒毛，圆形边缘不规则	5	5	3	7
S2	白色，表面无绒毛，有白色液滴	1-2	18	11	24
S3	黄色，表面无绒毛，如同黄色液斑	20-30	11	7	15

③比较乳酸链球菌素添加量对腐败细菌的抑制效果：以自制的新鲜豆浆为材料，经相应处理后，在37℃下放置35d后，统计豆浆中腐败细菌数量，结果如图：

（1）日常生活中经常用到的消毒方法是______________，步骤②中培养基的灭菌方法是_________________________。

（2）步骤②中适宜采用的接种方法是__________，固体培养基制备的步骤为____________________。培养中统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止____________________________。

（3）步骤③结果表明，最能耐受乳酸链球菌素的细菌是___________，为有效防止豆浆腐败，在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在________mg•kg^-1左右。

（4）乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂，它是由34个氨基酸组成的多肽。与用抗生素防腐相比，使用乳酸链球菌素防腐的优点是__________________。

Answer

煮沸消毒法 高压蒸汽灭菌法 稀释涂布平板法 计算→称量→溶化→灭菌→倒平板 因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目 S1 250 食用后会被人体消化，不会改变人体肠道内正常菌群

【解析】

由题文描述可知：该题综合考查学生对微生物的实验室培养基、微生物的分离和计数等相关知识的识记和理解能力，以及对实验结果的分析能力。

(1) 日常生活中经常用到煮沸消毒法。在实验室中，通常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。

(2) 步骤②需要对“腐败细菌进行初步分离和计数”，因此适宜采用的接种方法是稀释涂布平板法。固体培养基制备的步骤为：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。为了防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目，统计菌落的种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定为止。

(3) 分析曲线图可知，随着乳酸链球菌素添加量的增大，S1细菌数量的相对值最高，由此表明最能耐受乳酸链球菌素的细菌是S1。当乳酸链球菌素添加量为250mg．kg-1后，细菌数量的相对数值不再随乳酸链球菌素添加量的增大而降低；可见，为有效防止豆浆腐败，在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在250mg．kg-1左右。

(4) 乳酸链球菌素是一种由34个氨基酸组成的多肽，食用后会被人体消化，不会改变人体肠道内正常菌群，这正是使用乳酸链球菌素防腐比使用抗生素防腐的优点所在。