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萌发的小麦种子中淀粉酶活性较强,主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶不耐酸、...

萌发的小麦种子中淀粉酶活性较强,主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下迅速失活,而β-淀粉酶不耐热,在70℃条件下15min后失活。

某生物兴趣小组设计了“测定小麦种子中α-淀粉酶催化效率”的实验。

实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1cm)。

主要试剂及仪器:麦芽糖标准液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅等。

实验步骤:

步骤一:制作麦芽糖梯度液。取7支干净的具刻度试管,编号,按表加入试剂,再将试管置于60℃水浴中加热2min,取出后按试管号顺序排列。

试剂

试管号

1

2

3

4

5

6

7

麦芽糖标准液/mL

0

0.2

0.6

1.0

1.4

1.6

2.0

蒸馏水/mL

X

1.8

1.4

Y

0.6

0.4

Z

斐林试剂/mL

2.0

2.0

2.0

2.0

2.0

2.0

2.0

 

步骤二:萌发3天的小麦种子制备淀粉酶溶液。

步骤三:将装有淀粉酶溶液的试管____________________________

步骤四:另取两支试管编号A、B,分别向A、B试管中加入2mL己经处理的酶溶液(忽略其中含有的少量麦芽糖)和蒸馏水,并置于40℃恒温水浴中保温lOmin,然后再向A、B试管各加入40℃的5mL5% 淀粉溶液,然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中,摇匀后继续在40℃温水浴中保温lOmin。

步骤五:取A、B试管中反应溶液各2mL分别加入E、F试管,然后向E、F试管分别加入_______________

再置于60℃水浴加热2min后观察颜色变化。

结果将E试管中颜色与_进行比较,获得该试管中麦芽糖浓度,并计算出α-淀粉酶催化效率。

请补充以上相应步骤并分析回答以下问题:

(1)步骤一的1、4、7试管中加入蒸馏水的量(X、Y、Z)分别是__________________________(单位:mL)。

(2)实验中B试管起__________________________作用,具体是检测实验使用的淀粉溶液中____________

(3)若要测定另一种淀粉酶的活性,则需在步骤______________进行改变。

 

置于70℃水浴中15min;取出后冷却 2mL斐林试剂 2.OmL、1.0 mL、0mL 对照 是否存在还原糖 三 【解析】 α-淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下迅速失活,而β-淀粉酶不耐热,在70℃条件下15min后失活。实验步骤三:将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15min,取出后迅速冷却,这样导致β-淀粉酶失活,因此该实验的目的是探究小麦种子中α淀粉酶的催化效率。实验设计要遵循对照原则和单一变量原则。 歩骤三:因为本实验的目的是测定小麦种子中α淀粉酶的催化效率。β淀粉酶不 耐热,在70℃条件下15min后失活,以排除β淀粉酶对实验结果的干扰。 步骤五:斐林试剂可在水浴加热的条件下鉴定还原糖的存在,所以步骤五的做法中要补上2mL斐林试剂; (1)实验设计要遵循对照原则和单一变量原则,所以各个试管中液体的总量要相等,则步 骤一的1、4、7试管中加入蒸馏水的量(X、Y、Z)分别是2mL、l.OmL、OmL。 (2)实验中B试管起对照作用,具体作用是检测实验使用的淀粉溶液中是否存在还原糖。 (3)若要测定另一种淀粉酶的活性,则需在步骤三进行改变。
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