把要研究的生物大分子或细胞结构，从复杂的细胞混合物中分离出来，是生物科学研究中经常要做的工作。用下列分离技术不能达到实验目的的是
A. 差速离心法能将各种细胞器分离开
B. 盐酸能使染色质中的DNA和蛋白质分离
C. 搅拌能使吸附在细菌上的噬菌体与细菌分离
D. 纸层析法可从蓝藻中分离出叶绿素和类胡萝卜素
染色体数目相同的两种二倍体植物A和B，某研究小组拟培育同时有两者优良特性的新型植物。
（1）过程①用____________________酶去除细胞壁，获得具有生活力的原生质体，再用诱导剂_______________诱导二者融合，形成的融合细胞进一步培养，经过③___________、④___________形成完整的杂种植株。这种育种技术称为_______________ ，其依据的生物学原理有________________________________。
（2）在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察,根据细胞膜表面的荧光的不同可观察到________种不同的原生质体,当观察到_________________________________________时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。
（3）杂种细胞培育成的“A—B”植株为______倍体（单、二或四），假设A与B有性杂交的后代是不育的，而杂种植物“A—B”是可育的，造成这种差异的原因是__________________________________。
截至2017年9月30日我国累计报告艾滋病病例264302例，防艾迫在眉睫。科学工作者从HIV感染自愈者体内采取相应免疫细胞，使之与骨髓瘤细胞结合，生产HIV的抗体，具体过程见下图。请回答相关问题：
(1)HIV自愈者免疫细胞是指_________________，甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是________________，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，其目的是筛选获得具有___________ 特点的抗HIV抗体的杂交瘤细胞。
(2)HIV病毒专一侵染T淋巴细胞的原因是_____________________________________。
(3)转基因技术被运用到了HIV的疫苗的研制工作中，该技术操作的关键步骤是___________________，为使目的基因在受体中高效表达，需要把目的基因片段插入到表达载体的_____________之间。
(4)用DNA—RNA分子杂交技术确定目的基因是否完成了________(转录、翻译)。
(5)科学工作者发现一种D蛋白，其31号位的色氨酸替换成酪氨酸后，就能与HIV表面的糖蛋白结合，从而使HIV病毒失去侵染T细胞的能力，若利用该蛋白防治艾滋病，用到的现代生物技术有____________________________。
2017年引起世界轰动的克隆猴在中国诞生。科研人员提取了一个流产的雌性猕猴胎儿的部分体细胞，将其细胞核“植入”若干个“摘除”了细胞核的卵母细胞，经过一系列技术操作，先后得到了“华华”和“中中”两只长得几乎一模一样的猕猴。请回答下列问题：
（1）供体体细胞来自猕猴胎儿，从胎儿体内取出的组织用____________酶处理一段时间，就会分散成单个体细胞，之后进行的初次培养称为____________。为保证培养的细胞处于无菌无毒的环境中，通常采取的措施是____________________________ 。用于核移植的供体细胞一般选用10代以内的细胞作为供体细胞，原因是 __________________________。
（2）供体细胞注入去核卵母细胞后，通过_____________方法使两细胞融合，构建重组胚胎。重组胚胎移植到__________ 、_____________的其他雌性猕猴体内，使之继续发育为体细胞克隆猴。重组胚胎在代孕母猴体内存活，其生理学基础是 _____________________。
胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。请根据动物受精和早期胚胎发育过程回答下列问题：
（1）在动物体内卵子的发生过程中，减数第一次分裂完成的时间是在雌性个体 ，当次级卵母细胞发育到 时期时才具备与精子受精的能力，受精的场所是 ，判断卵子是否受精的重要标志是____ 。
（2）受精过程中防止多精入卵的两道屏障是____ 和 。
（3）胚胎发育过程首先是卵裂，所得每个子细胞的体积比受精卵___ _，胚胎发育到 期会导致透明带破裂，胚胎从中伸展出来，这一过程叫做孵化。
（4）胚胎干细胞是由囊胚的____ 或 中分离出来的一类细胞，在人类疾病治疗和科学研究中有着广泛的应用。
Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
请回答：
（1）该技术流程所涉及的生物工程技术有_________________。
①动物细胞培养 ②细胞核移植 ③胚胎干细胞的分离与培养 ④转基因 ⑤动物细胞融合
（2）在步骤①前，应采用______________普遍使用的方法）对卵母细胞进行处理。
（3）ES细胞在功能上的特性是______。在体外培养时，在培养液中添加____，就可以诱导ES细胞向造血干细胞分化。
（4）左图表示含有Rag2基因的DNA片段，右图表示pZHZ11质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ、SmaⅠ4种限制酶识别的碱基序列和切割位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、G↓AATTC、CCC↓GGG。
Rag2基因的获得可以从鼠的胎盘细胞中提取 ________，通过逆转录方法合成含Rag2基因的DNA片段。若将Rag2基因和如图的质粒连接形成重组质粒，那么应选用 _______限制酶切割，而后加入DNA连接酶进行连接。
（5）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据_____________设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。
（6）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞中的___________，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。
