Question

Ⅰ狂犬病是由狂犬病病毒引起的人畜共患的烈性传染病，制备鼠源性抗狂犬病病毒单克隆抗体是检测狂犬病病毒、治疗狂犬病的有效措施之一。请回答下列问题：

（1）用狂犬病病毒的RRIG蛋白免疫小鼠，一段时间后，若小鼠血清中检出_________的抗体，则说明小鼠产生了免疫反应。再从小鼠脾细胞中获取______，然后将其与骨髓瘤细胞融合。

（2）在细胞融合完成后，筛选出杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的特点是_____

（3）得到的单克隆抗体能准确地识别出RRIG蛋白，原因是单克隆抗体具有 ________的特性。

ⅡDNA序列D能在基因A表达的转移酶作用下，从序列D所在染色体的某个位置转移到其他位置，或随机转移到其他染色体上。科研人员利用这一原理来构建稳定遗传的大豆突变体库。

（1）科研人员分别将序列D和基因A作为____________，插入含卡那霉素抗性基因的T-DNA上，利用农杆菌转化植物，筛选得到转D植株和转A植株。

（2）将得到的转D植株或转A植株自交，若某植株所结种子中具有卡那霉素抗性的占_________，则判断该植株为T-DNA单拷贝插入。继续种植具有卡那霉素抗性的种子，长成植株后进行自交，若某植株所结种子_____________________________，可获得纯合的转D植株或转A植株。

（3）科研人员将纯合的转D植株与转A植株杂交，并根据转入两种植株中的DNA序列的差异，用PCR方法确定杂交是否成功，结果如下图所示：

据图可知，F₁植株编号为________________________的杂交组是杂交成功的。

Answer

抗RRIG蛋白 B淋巴细胞 无限增殖且能产生专一性抗体 特异性强，灵敏度高 目的基因 3/4 全部具有卡那霉素抗性 3～5、7～9、11

【解析】

据题文描述可知：本题考查学生对生产单克隆抗体、基因工程的基本操作程序、基因的分离定律等相关知识的识记和理解能力，以及获取信息、分析问题的能力。

Ⅰ(1) 狂犬病病毒的RRIG蛋白属于抗原，在抗原的刺激下，机体会产生相应的抗体。可见，用狂犬病病毒的RRIG蛋白免疫小鼠，一段时间后，若小鼠血清中检出抗RRIG蛋白的抗体，则说明小鼠产生了免疫反应。之后，将从免疫小鼠脾细胞中获取的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。

(2) 杂交瘤细胞具有无限增殖且能产生专一性抗体的特点。

(3) 由于制备的鼠源性抗狂犬病病毒的单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特性，因此能准确地识别出RRIG蛋白。

Ⅱ(1)依题意可知：可分别将序列D和基因A作为目的基因，插入含卡那霉素抗性基因的T-DNA上，利用农杆菌转化植物，筛选得到转D植株和转A植株。

(2) T-DNA上含卡那霉素抗性基因，若将T-DNA单拷贝插入植株的染色体上，则该转D植株或转A植株相当于与卡那霉素抗性基因有关的杂合子，其自交植株所结种子中具有卡那霉素抗性的占3/4，其中纯合子与杂合子之比约为1∶2，纯合子自交后代不发生性状分离。可见，继续种植具有卡那霉素抗性的种子，长成植株后进行自交，若某植株所结种子全部具有卡那霉素抗性，则可获得纯合的转D植株或转A植株。

(3) 将纯合的转D植株与转A植株杂交，F1植株中应同时具有序列D和基因A，据此分析图示可知：F1植株中编号为3～5、7～9、11的植株同时具有序列D和基因A，说明这些植株的杂交组是杂交成功的。