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转基因抗病甜椒的培育过程如图所示。质粒上有Pst I、Sma I、EcoR I、...

转基因抗病甜椒的培育过程如图所示。质粒上有Pst I、Sma I、EcoR I、 Apa I等四种限制酶切割位点。请回答:

(1)构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶_________进行切割。

(2)通常采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞时,受体应选_____(填“正常叶”或“损伤叶”),原因是 ____________

(3)培养基中的卡那霉素会抑制甜椒愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的甜椒细胞,应使A中含有的________作为标记基因。

(4)在适宜条件下,图中①培养基中生长素与细胞分裂素的比例适中,且生长素的含量___(填“低于”或“等于”或“高于”)细胞分裂素时,主要诱导植物组织________________

 

PstⅠ、EcoRⅠ 含抗病基因的DNA、质粒 损伤叶 植物受到损伤时伤口处细胞会分泌大量的酚类化合物,吸引农杆菌移向这些细胞 抗卡那霉素基因 高于 脱分化 【解析】 本题以转基因抗病甜椒的培育过程图为情境,考查学生对基因工程的基本操作程序、植物组织培养的过程等相关知识的识记和理解能力,以及获取信息、分析问题的能力。 (1) 依题意并分析图示可知:抗病基因中存在SmaⅠ的识别位点,若使用SmaⅠ切割含抗病基因的DNA,则会破坏抗病基因的结构;抗病基因的两端分别含有PstⅠ、EcoRⅠ的识别位点,用PstⅠ、EcoRⅠ切割含抗病基因的DNA,能保持抗病基因结构的完整性,而且质粒上也含有PstⅠ、EcoRⅠ的识别位点。所以构建含抗病基因的表达载体A时,应选用的限制酶有PstⅠ、EcoRⅠ对含抗病基因的DNA、质粒进行切割。 (2) 当植物体受到损伤时,伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物,吸引农杆菌移向这些细胞,所以采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞时,受体应选损伤叶。 (3) 培养基中的卡那霉素会抑制甜椒愈伤组织细胞的生长;若甜椒细胞中含有抗卡那霉素基因,则抗卡那霉素基因的表达产物会解除卡那霉素对甜椒愈伤组织细胞生长的抑制作用。抗卡那霉素基因属于基因工程中的标记基因,其作用是供重组DNA的鉴定和选择,即鉴别和筛选受体细胞是否含有目的基因。可见,欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的甜椒细胞,应使表达载体A中含有抗卡那霉素基因,以此作为标记基因。 (4) 图中使用①培养基培养的目的是:使甜椒组织块通过脱分化形成愈伤组织。培养基中生长素与细胞分裂素的比例适中,且生长素的含量高于细胞分裂素时,细胞分裂素的作用呈现加强趋势,主要诱导植物组织脱分化。
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科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图,请回答下列问题:

(1)图中卵母细胞应在体外培养到______期,步骤①应先对卵母细胞进行______处理。

(2)由图可知,步骤②要分离出ES细胞,需将重组胚胎培养到______期。

(3)步骤③选择ES细胞作为受体细胞而不是上皮细胞,是因为ES细胞______,该过程需要先利用______技术扩增干扰素基因,其前提是要有一段已知干扰素基因的核苷酸序列以便合成______

(4)步骤④应在培养液中加入______。为检测干扰素基因是否在小鼠体内成功表达,可以采用______技术。

 

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Ⅰ狂犬病是由狂犬病病毒引起的人畜共患的烈性传染病,制备鼠源性抗狂犬病病毒单克隆抗体是检测狂犬病病毒、治疗狂犬病的有效措施之一。请回答下列问题:

(1)用狂犬病病毒的RRIG蛋白免疫小鼠,一段时间后,若小鼠血清中检出_________的抗体,则说明小鼠产生了免疫反应。再从小鼠脾细胞中获取______,然后将其与骨髓瘤细胞融合。

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(3)得到的单克隆抗体能准确地识别出RRIG蛋白,原因是单克隆抗体具有 ________的特性。

ⅡDNA序列D能在基因A表达的转移酶作用下,从序列D所在染色体的某个位置转移到其他位置,或随机转移到其他染色体上。科研人员利用这一原理来构建稳定遗传的大豆突变体库。

(1)科研人员分别将序列D和基因A作为____________,插入含卡那霉素抗性基因的T-DNA上,利用农杆菌转化植物,筛选得到转D植株和转A植株。

(2)将得到的转D植株或转A植株自交,若某植株所结种子中具有卡那霉素抗性的占_________,则判断该植株为T-DNA单拷贝插入。继续种植具有卡那霉素抗性的种子,长成植株后进行自交,若某植株所结种子_____________________________,可获得纯合的转D植株或转A植株。

(3)科研人员将纯合的转D植株与转A植株杂交,并根据转入两种植株中的DNA序列的差异,用PCR方法确定杂交是否成功,结果如下图所示:

据图可知,F1植株编号为________________________的杂交组是杂交成功的。

 

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几百年来在珠江三角洲地区流行的“桑基鱼塘”是将低洼稻田挖深作塘,塘内养鱼,塘基上种桑,用桑养蚕,蚕粪养鱼,鱼粪肥塘,塘泥肥田、肥桑,从而获得稻、鱼、蚕三丰收。下列有关“桑基鱼塘”说法不正确的是(  )

A. 该生态系统在一定程度上实现了对能量的多级利用    B. 该生态系统是生态农业的雏形

C. 该生态系统物种多样性得到了较好的保护    D. 该生态系统稳定性的维持需要人的干预

 

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某线性DNA分子含有5000个碱基对(bp),先用限制酶a切割,再把得到的产物用限制酶b切割,得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的识别序列和切割位点如下图所示。下列有关说法正确的是

A.在该DNA分子中,a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个

B.a酶与b酶切出的粘性末端不能相互连接

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D.用a酶切割与线性DNA相同碱基序列的质粒,得到4种切割产物

 

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生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的“复生”将不再是神话.如果世界上最后一只野驴刚死亡,以下较易成为“复生”野驴的方法是 (    )

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B. 将野驴的体细胞两两融合,再经组织培养培育成新个体

C. 取出野驴的体细胞的细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中,再经胚胎移植孕育培养成新个体

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