某种荧光蛋白（GFP）在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5′末端，获得了L1-GFP融合基因（简称为甲）作目的基因，并将其插入质粒P0，构建了真核表达载体P1，其部分结构和酶切位点的示意图如下，图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。回答下列问题：
（1）据图推断，该团队在将甲插入质粒P0时，使用了两种限制酶，这两种酶是_________。使用这两种酶进行酶切是为了保证_______________的完整性，启动子能与_______特异性结合驱动转录开始。
（2）将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了________和_________过程。
（3）为了获得含有甲的牛，该团队需要做的工作包括：将能够产生绿色荧光细胞的_____________移入牛的____________中、体外培养、胚胎移植等。
（4）为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的_________（填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”）作为PCR模板。
转基因抗病甜椒的培育过程如图所示。质粒上有Pst I、Sma I、EcoR I、 Apa I等四种限制酶切割位点。请回答：
（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶_____对____进行切割。
（2）通常采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞时，受体应选_____（填“正常叶”或“损伤叶”)，原因是 ____________。
（3）培养基中的卡那霉素会抑制甜椒愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的甜椒细胞，应使A中含有的________作为标记基因。
（4）在适宜条件下，图中①培养基中生长素与细胞分裂素的比例适中，且生长素的含量___（填“低于”或“等于”或“高于”）细胞分裂素时，主要诱导植物组织________________。
科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图，请回答下列问题：
（1）图中卵母细胞应在体外培养到______期，步骤①应先对卵母细胞进行______处理。
（2）由图可知，步骤②要分离出ES细胞，需将重组胚胎培养到______期。
（3）步骤③选择ES细胞作为受体细胞而不是上皮细胞，是因为ES细胞______，该过程需要先利用______技术扩增干扰素基因，其前提是要有一段已知干扰素基因的核苷酸序列以便合成______。
（4）步骤④应在培养液中加入______。为检测干扰素基因是否在小鼠体内成功表达，可以采用______技术。
Ⅰ狂犬病是由狂犬病病毒引起的人畜共患的烈性传染病，制备鼠源性抗狂犬病病毒单克隆抗体是检测狂犬病病毒、治疗狂犬病的有效措施之一。请回答下列问题：
（1）用狂犬病病毒的RRIG蛋白免疫小鼠，一段时间后，若小鼠血清中检出_________的抗体，则说明小鼠产生了免疫反应。再从小鼠脾细胞中获取______，然后将其与骨髓瘤细胞融合。
（2）在细胞融合完成后，筛选出杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的特点是_____
（3）得到的单克隆抗体能准确地识别出RRIG蛋白，原因是单克隆抗体具有 ________的特性。
ⅡDNA序列D能在基因A表达的转移酶作用下，从序列D所在染色体的某个位置转移到其他位置，或随机转移到其他染色体上。科研人员利用这一原理来构建稳定遗传的大豆突变体库。
（1）科研人员分别将序列D和基因A作为____________，插入含卡那霉素抗性基因的T-DNA上，利用农杆菌转化植物，筛选得到转D植株和转A植株。
（2）将得到的转D植株或转A植株自交，若某植株所结种子中具有卡那霉素抗性的占_________，则判断该植株为T-DNA单拷贝插入。继续种植具有卡那霉素抗性的种子，长成植株后进行自交，若某植株所结种子_____________________________，可获得纯合的转D植株或转A植株。
（3）科研人员将纯合的转D植株与转A植株杂交，并根据转入两种植株中的DNA序列的差异，用PCR方法确定杂交是否成功，结果如下图所示：
据图可知，F1植株编号为________________________的杂交组是杂交成功的。
几百年来在珠江三角洲地区流行的“桑基鱼塘”是将低洼稻田挖深作塘，塘内养鱼，塘基上种桑，用桑养蚕，蚕粪养鱼，鱼粪肥塘，塘泥肥田、肥桑，从而获得稻、鱼、蚕三丰收。下列有关“桑基鱼塘”说法不正确的是（ ）
A. 该生态系统在一定程度上实现了对能量的多级利用 B. 该生态系统是生态农业的雏形
C. 该生态系统物种多样性得到了较好的保护 D. 该生态系统稳定性的维持需要人的干预
某线性DNA分子含有5000个碱基对（bp），先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的识别序列和切割位点如下图所示。下列有关说法正确的是
A．在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个
B．a酶与b酶切出的粘性末端不能相互连接
C．a酶与b酶切断的化学键不相同
D．用a酶切割与线性DNA相同碱基序列的质粒，得到4种切割产物
