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亚麻酸(ALA)能够促进卵母细胞体外成熟和囊胚发育。为了给水牛体外胚胎产业化生产...

亚麻酸(ALA)能够促进卵母细胞体外成熟和囊胚发育。为了给水牛体外胚胎产业化生产中合理使用亚麻酸提供理论依据,科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早期胚胎发育的影响。分析回答:

①卵母细胞的收集和体外培养:从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞,随机分成5组,分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中,在39℃、5%CO2的培养箱中培养22~24h。

②卵母细胞成熟判断:在显微镜下观察卵母细胞,判断其是否成熟,统计结果如表1。

③体外受精:在受精溶液中进行体外受精后,用显微镜观察判断是否完成受精。

④早期胚胎培养:将受精卵移入胚胎培养液中培养44~48h后检查分裂情况,每隔48h 更换一次培养液,第5~9天观察囊胚发育情况,统计结果如表2。

(1)步骤①中,细胞培养箱中加5% CO2 的作用是_________________

(2)步骤②中,成熟卵母细胞内染色体的行为特征是_____________________________,步骤③中,判断是否受精的依据是在卵细胞膜和透明带的间隙可否观察到_____________

(3)步骤④中,受精卵经过卵裂期、________(时期)发育成囊胚,培养过程定期更换培养液的目的是_________________________________________________

(4)根据实验数据分析,亚麻酸溶液为200μmol·L-1 时,对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起________作用。

(5)本实验结果表明,______________μmol·L-1的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都较有利,其判断依据是__________________________________________________

 

维持培养液pH的相对稳定 染色体的着丝点排列在赤道板上 两个极体 桑椹胚 清除有害代谢产物 补充营养物质 促进 50 核成熟卵子数占卵母细胞的比例较高,囊胚数占培养卵数的比例较高 【解析】 本题以亚麻酸的作用为背景,结合图表考查动物细胞培养、体外受精及早期胚胎发育的过程和识记等相关知识,旨在考查考生信息获取的能力、实验探究能力与知识的综合运用能力。 (1)步骤①(动物细胞培养)过程中,细胞培养箱中加5% CO2 的作用是维持培养液pH的相对稳定; (2)成熟卵母细胞处于减数第二次分裂中期,此时染色体的行为特征是染色体的着丝点排列在赤道板上;判断是否受精的依据是在卵细胞膜和透明带的间隙可否观察到两个极体; (3)受精卵经过卵裂期、桑椹胚可发育成囊胚,培养过程定期更换培养液的目的是清除有害代谢产物及补充营养物质; (4)对比亚麻酸溶液0和200μmol·L-1时,核成熟卵子数和囊胚数占培养数的比例,可知浓度为200μmol·L-1时对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起促进作用; (5)亚麻酸溶液浓度为50μmol·L-1时,核成熟卵子数占卵母细胞的比例较高,囊胚数占培养卵数的比例较高,说明50μmol·L-1的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都较有利。
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考点分析:
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科学家利用细胞融合技术研究细胞膜的结构特性,进行了下列实验。

(1)将鼠细胞和人细胞在CO2培养箱中培养一段时间,用_____处理,获取实验用的单细胞悬液。 

(2)将两种细胞在37℃下混合培养,在培养液中加入_______诱导融合,形成融合细胞,一般两两融合的细胞有____种。 

(3)细胞膜的主要成分是______和蛋白质。将连接了荧光染料的抗体与融合细胞在一定条件下培养,抗体与融合细胞的膜蛋白(抗原)特异性结合,其目的是标记膜蛋白,以便于显微镜观察。用荧光显微镜观察融合细胞表面荧光的颜色和____,开始时,鼠的细胞为绿色,人的细胞为红色,两种颜色不混合;一段时间后,可观察到红绿荧光交替分布的“嵌合体”。统计______,结果如下图所示。 

(4)科学家据此提出两种假说解释嵌合体的形成。

假说一:融合细胞合成了新的膜蛋白;

假说二:原有膜蛋白在细胞膜平面上运动。

①使用_______抑制剂和ATP合成抑制剂分别处理融合细胞,均对嵌合体形成没有显著影响,这个结果否定了假说一。 

②在15℃、20℃、26℃的培养温度下重复上述实验,这些实验的结果为________,为假说二提供了证据支持。

 

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甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料,利用植物组织培养技术繁殖该植物。

(1)以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体,在一定条件下进行组织培养,均能获得试管苗,其原理是________________________

(2)若想培育一株新品种,既有此植物的性状还有其他植物的性状,理论上可以采用______________技术,细胞融合成功的标志是杂种细胞再生出新的____________,该技术的优点是_______________________________

(3)图中A、B、C所示的是不同的培养结果,该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的,这两种激素是_________________,A中的愈伤组织是叶肉细胞经__________形成的。

(4)若该种植物是一种杂合体的名贵花卉,要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉,可用组织培养方法繁殖,在培养时,___________(填“能”或“不能”)采用花药离体培养,原因是__________________________________________________

 

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植物基因工程中,往往用光诱导型启动子(PrbcS)使目的基因表达,其结合T基因后能使目的基因更高水平表达。下图中①和②都为基因表达载体构建过程中的中间载体,请分析重组载体的部分构建过程并回答下列问题:

注:Ampr/Kmr分别为氨苄青霉素/卡那霉素抗性基因。origin为复制原点,其余为限制酶酶切位点。

(1)对双子叶植物进行基因工程改造最常用的方法是____________,还需结合__________技术才能获得新性状的植株。

(2)中间载体通常用______________法导入微生物中扩增,含有中间载体②­PrbcS­*T的微生物________(“能”或“不能”)在含有卡那霉素的培养基中生长,________(“能”或“不能”)在含有氨苄青霉素的培养基中生长。

(3)经酶切后凝胶电泳,测得2B片段为0.4kb,经图示信息分析,Prbcs­*T的长度约为____________________。据图分析,中间载体②­2B形成中间载体②­PrbcS­*T,需要使用限制酶_________________切割。

(4)在T基因前“点突变引入NcoⅠ”酶切位点的方法是:设计包含_________识别序列的引物,然后用PCR技术扩增。

 

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下列有关微生物培养的叙述,错误的是

A. 涂布接种时,涂布器经火焰灭菌后应趁热使用

B. 纯化培养时,培养皿应倒置放在恒温培养箱内培养

C. 分离计数时,可用稀释涂布平板法对需计数的微生物进行分离

D. 观察菌落时,应将培养皿盖拿掉以利于看清菌落的形态特征

 

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如图是探究果酒与果醋发酵的装置示意图,下列相关叙述正确的是

A. 改变通入气体种类,可以研究呼吸作用类型对发酵的影响

B. 果酒发酵中期通入氮气,酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸

C. 果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关

D. 气体入口与气体出口可以交换使用

 

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