Question

农作物秸秆是重要的生物资源，下图是研究人员筛选纤维素分解菌的部分实验过程，请回答相关问题：

（1）应用______溶解土壤.培养基A的成分为纤维素粉、Na₂HPO₄·7H₂O、K₂HPO₄、MgSO₄·7H₂O、KCl、酵母膏、水解酪素和水。培养基B是培养基A中加入某种成分制得，该成分为______.用培养基A进行培养的目的是__________________________。

培养基B________（选填“有”或“无”）选择作用，请设计一个对照实验来验证你的判断：__________________________________________________________________________________________。

（2）取培养基B中的菌落1按照严格无菌操作接种于培养基C，在适宜条件下培养后出现两种单菌落a和b，最可能的原因是_____________________。

（3）对菌落a中纤维素分解菌所产纤维素酶的活力进行了探究，结果如下。

一个酶活力单位是指______________________。若用菌落a中的纤维素分解菌分解秸秆，则pH和温度应分别是____________________。

Answer

无菌水 琼脂 增加纤维素分解菌的浓度 有 将培养基A培养的菌液接种于牛肉膏蛋白胨培养基，比较该培养基上与培养基B上的菌落数 菌落1是由两个纤维素分解能力不同的菌繁殖而成 最适反应条件下，1min转化1mmol底物所用的酶量 6 20℃

【解析】

纤维素分解菌可以产生纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶；金属接种工具常用灼烧灭菌；刚果红染液与纤维素呈红色，纤维素分解菌在含有刚果红染液的培养基中形成的菌落会出现透明圈，可以用来鉴别纤维素分解菌。

（1）溶解土壤样品时，应用无菌水。培养基A为液体选择培养基，培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度；培养基B的目的是分离菌种，应用固体培养基，需要在液体培养基A中加入琼脂。由于培养基B中有大量的纤维素粉，在该培养基上长出的菌多数是能分解纤维素的，因此具有一定的选择作用，因此可用完全培养基即牛肉膏蛋白胨培养基来检验其是否有选择作用，理论上若培养基B有选择作用则在完全培养基上长出的菌落数和种类会较多。

（2）理论上菌落是由一个活菌繁殖形成的，但实际情况有可能有的菌落是由2个或多个活菌一起繁殖而成，若是这种情况，则对菌落中的菌作进一步分离，可看到不同菌形成的菌落。根据题意分析，取培养基B中的菌落1按照严格无菌操作接种于培养基C，在适宜条件下培养后出现两种单菌落a和b，说明菌落1是由两个纤维素分解能力不同的菌繁殖而成。

（3）一个酶活力单位是指在温度和pH等最适的条件下，1min转化1mmol底物所用的酶量。从图中可看出纤维素酶活力最大时对应的pH为6，温度为20℃。