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植物中瞬时表达检测是一种快速的分析系统,它被广泛地用于分析基因功能,如基因表达、...

植物中瞬时表达检测是一种快速的分析系统,它被广泛地用于分析基因功能,如基因表达、蛋白活性及蛋白与蛋白的相互作用等。常用的植物瞬时表达系统有洋葱表皮细胞、愈伤组织、烟草叶片及原生质体等。原生质体处于相同的分离周期,导入的外源基因表达具有较好的同步性,同时不需进行长时间的组织培养,因而对原生质体制备条件的优化具有重要意义。

(1)原生质体的分离与纯化:在无菌条件下,取无菌苗叶片,放入含有一定浓度____酶的酶解液,水浴加热处理一段时间后过滤,将滤液采用1000×g离心力离心两分钟,纯化得到原生质体。该过程中,请概述3个影响原生质体产量的因素:____________________

(2)原生质体活性检测:原生质体活力以一个视野中发绿色荧光的原生质体占该视野中原生质体总数的百分数来表示。在进行原生质体转化时所构建的基因表达载体包括标记基因、复制原点、_______________。若在某原生质体中观察到了绿色荧光,则说明基因在该原生质体中完成了_____________过程。

(3)一般来说,植物各个器官,如:根、茎、叶、花及愈伤组织等都可作为分离原生质体的材料。其中_______分离得到的原生质体适合用于研究光合活性。

 

纤维素酶和果胶 酶解液中酶的浓度,酶解时间,离心力大小 启动子、终止子和绿色荧光蛋白基因 转录 翻译 (新鲜)叶肉细胞 【解析】 本题以原生质体的分离纯化、活性检测为背景,考察基因工程与细胞工程的相关内容。 (1)植物细胞外面有一层细胞壁,主要成分为纤维素和果胶,为获得具有活力的原生质体,必须先利用纤维素酶和果胶酶去除这层细胞壁。原生质体分离过程中的酶浓度、酶解时间和离心力大小等都会对原生质体的产量和活力产生影响。 (2)基因表达载体包括标记基因、启动子终止子和目的基因,这里的目的基因是绿色荧光蛋白基因。若在某原生质体中观察到了绿色荧光,则说明绿色荧光蛋白基因在该原生质体中完成了转录和翻译过程。 (3)适合用于研究光合活性的原生质体中必须含有叶绿体,因此新鲜叶肉细胞是最合适的材料,而根、茎、花等器官中基本不含有叶绿体,愈伤组织的培养在暗处且不含叶绿体,也不合适。
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农作物秸秆是重要的生物资源,下图是研究人员筛选纤维素分解菌的部分实验过程,请回答相关问题:

(1)应用______溶解土壤.培养基A的成分为纤维素粉、Na2HPO4·7H2O、K2HPO4、MgSO4·7H2O、KCl、酵母膏、水解酪素和水。培养基B是培养基A中加入某种成分制得,该成分为______.用培养基A进行培养的目的是__________________________

培养基B________(选填“有”或“无”)选择作用,请设计一个对照实验来验证你的判断:__________________________________________________________________________________________

(2)取培养基B中的菌落1按照严格无菌操作接种于培养基C,在适宜条件下培养后出现两种单菌落a和b,最可能的原因是_____________________

(3)对菌落a中纤维素分解菌所产纤维素酶的活力进行了探究,结果如下。

一个酶活力单位是指______________________。若用菌落a中的纤维素分解菌分解秸秆,则pH和温度应分别是____________________

 

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果蝇的野生型是红眼,该性状由两对等位基因控制,A/a基因位于常染色体上,B/b基因位于X染色体上,现有两个朱眼突变纯系(纯合子),分别为A系和B系,野生型纯合子为C系。用A、B、C三个系做如下杂交实验,得到以下实验结果:

实验一:A、B系的雄性分别与C系的雌性杂交,F1全为红眼。

实验二:A系雌性和B系雄性杂交,F1的雌性是红眼,雄性是朱眼。

实验三:B系雌性和A系雄性杂交,F1全为红眼。

(1)依据实验一,A、B系为__________(显性、隐性)突变纯系。

(2)依据实验二和实验三,A、B纯系的基因型分别是____________________。红眼果蝇的基因型有________种。

(3)将实验二中F1雌雄个体相互交配,得到的F2中产生很多品系。其中D系中的任何个体与A或B系的个体杂交,其子代个体全是朱眼。则这个D系的雌性和C系的雄性个体杂交,后代的表现型是______________

(4)将实验三中F1雌雄个体相互交配得到F2,请利用A、B、C系果蝇设计实验判断F2中某只红眼雄果蝇的基因型(要求:写出实验思路、预期实验结果)。_________________________

 

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近日,一项由美国Van Andel研究所的神经科学家维维安·拉比(Viviane Labrie)及其团队主导的研究结果发现,一向被忽略的阑尾,有可能存在与帕金森有关的脑损伤相关蛋白,这种蛋白在大脑中积累,伤害大脑多巴帕金森病时胺能神经元,引发帕金森发病。图示为正常人和帕金森患者的神经调节模式图,请回答下列问题:

(1)神经元的损伤可能会最终导致神经系统功能区域的彻底崩溃,其中神经元的结构包括_________________

(2)据图分析正常时,多巴胺能神经元受到适宜刺激时,会产生_________(填“兴奋”或“抑制”),然后释放多巴胺,使___________(填“Na+”“K+”或“Cl”)流入脊髓前角运动神经元。

(3)药物治疗是帕金森病最主要的治疗手段,据图分析抗帕金森病药物的作用机制:①促进多巴胺能神经元释放多巴胺;②_______________;③_____________________

 

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为了研究高温条件下不同干旱水平对大豆光合特性的影响,研究者利用“豫豆19”大豆进行了实验。分别研究了土壤水分条件正常组(CK),中度干旱组(L)和重度干旱(M)的丙二醛(MDA,膜脂氧化产物可反映膜系统受损程度)、脯氨酸(蛋白质分解产物)和叶绿素含量随高温干旱胁迫时间变化情况。结果如下图:

(1)实验时可用__________来提取光合色素再进行分离得到叶绿素,其中叶绿素a为_____色。

(2)由研究结果可知,随高温干旱胁迫时间的延长,三组大豆净光合速率都将呈现_____趋势,推测原因是______________________

(3)研究人员认为高温干旱环境还可能通过减小气孔导度从而降低大豆的光合速率,根据所学知识,你认为做出此假设的依据是_____________________________

 

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干细胞是生物体内非常重要的一类细胞,常用于许多医学研究,也与一些癌症有关。研究发现,在纺锤体定向蛋白的驱动下,干细胞能进行不对称的分裂,产生一个完全相同的子干细胞和一个能继续分化的细胞,以确保分化细胞和未分化细胞之间的数量平衡。

(1)干细胞是动物和人体内保留着的少数具有_________能力的细胞。

(2)干细胞在有丝分裂的_________期形成纺锤体,纺锤体在分裂后期的作用是________

(3)研究发现,有一些基因突变后,可诱导干细胞由不对称分裂转变为对称分裂,产生两个完全相同的子干细胞,使干细胞数量增多,进而导致癌症发生。这些基因属于_____(原癌/抑癌)基因,其作用是________

 

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