Question

如图为某种质粒简图，如图表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制 性核酸内切酶EcoRI、BamHI、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述错误的是

A. 如果用EcoRI对外源DNA和质粒进行酶切，将多个含有目的基因的DNA片段与多个质粒的酶切产物用DNA连接酶进行连接后，两两连接所形成的产物有三种

B. 如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRI酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoR I酶切点有1个

C. 为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时应使用BamHI和HindⅢ两种限制酶同时处理

D. —个图1所示的质粒分子经EcoRI切割后，含有2个游离的磷酸基团

Answer

B

【解析】

A．如果用EcoRⅠ对外源DNA和质粒进行酶切，将多个含有目的基因的DNA片段与多个质粒的酶切产物用DNA连接酶进行连接后，两两连接所形成的产物有三种，A正确；B．如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有2个，B错误；C．为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时应使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理，C正确；D．质粒切割前是双链环状DNA分子，所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键，故不含游离的磷酸基团．从图1可以看出，质粒上只含有一个EcoRⅠ的切点，因此被改酶切割后，质粒变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此图1所示的质粒分子切割后含有两个游离的磷酸基团，D正确。故选B。