Question

有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究和应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐、以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能产生纤维素酶的微生物。请分析后回答下列问题： 

(1)培养基中加入的化合物A是_______，为微生物的生长提供_______，这种培养基属于________培养基。

(2)在培养纤维素分解菌的过程中，进行平板划线时，每次划线结束后仍然要灼烧接种环，原因是________________________________。

(3)在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用________染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。甲同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于_____________(用图中标号作答)内。

(4)乙同学打算从牛胃中分离纤维素分解菌并计数，与分离醋酸菌相比，进行培养时除了营养不同外，最主要的实验条件差别是________________________，该同学采用活菌计数法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目______。

(5)丙同学在提取和分离纤维素酶的过程中，为了保证抵制外界酸和碱对酶活性的影响，采取的措施是向提取液和分离液中添加________。若探究纤维素酶活性的最适温度，如何设置对照？ ______________。

Answer

纤维素 碳源 选择 及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境或感染实验操作者 刚果红 ③ 保证无氧环境 小(低) 缓冲溶液 不同的温度梯度之间就可以相互对照

【解析】

本题主要考查纤维素分解菌的筛选、鉴定和无菌操作的相关内容，意在提高学生无菌操作意识与加深相关知识点的识记与理解。

（1）要筛选到能产生纤维素酶的微生物，应使用选择培养基，在培养基中加入纤维素作为唯一的碳源，能在此培养基中存活的微生物就是能产生纤维素酶的微生物；

（2）灼烧接种环最直接的目的是杀死残留微生物，结束后灼烧是为了避免污染环境或感染实验操作者；

（3）在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用刚果红染色法；刚果红与纤维素形成的红色复合物在纤维素被分解后将不再形成，则在培养基上出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，据图图中③以纤维素分解菌为中心的透明圈，所以纤维素分解菌位于其内；

（4）牛胃是一个厌氧的环境，所以其中的纤维素分解菌与需氧型醋酸菌培养条件有所不同；因是活菌计数，当菌落重合时，只能计数为一个菌落，故该同学采用活菌计数法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目小；

（5）为保证抵制外界酸和碱对纤维素酶活性的影响，可向提取液和分离液中添加缓冲溶液；探究最适温度可设置一系列的温度梯度相互对照，其他无关变量要适宜。