Question

下表为几种限制酶识别的序列和切割的位点。如下图，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是（　　）

限制酶	BamH Ⅰ	EcoR Ⅰ	PstⅠ
识别序列和 切割位点

A. 1为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为EcoRⅠ，4为PstⅠ

B. 1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ，4为PstⅠ

C. 1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为PstⅠ，4为EcoRⅠ

D. 1为EcoRⅠ， 2为PstⅠ， 3为PstⅠ，4为BamHⅠ

Answer

C

【解析】

基因工程的工具：限制酶、DNA连接酶、运载体。

若1为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为EcoRⅠ，4为PstⅠ，用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割后，目的基因两端的黏性末端是EcoRⅠ产生的，可以发生自身环化，A错误；若1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ，4为PstⅠ，用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割后，目的基因两端均为EcoRⅠ切割的黏性末端，会发生自身环化，B错误；1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为PstⅠ，4为EcoRⅠ，用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割后，目的基因两端的序列为用PstⅠ和EcoRⅠ切割后产生的不同的黏性末端，C正确；1为EcoRⅠ， 2为PstⅠ， 3为PstⅠ，4为BamHⅠ，用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割后，目的基因两端均为PstⅠ切割的黏性末端，会发生自身环化，D错误。故选C。