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图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点,ampr表示氨苄青霉素抗性基...

图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点,ampr表示氨苄青霉素抗性基因,neo表示新霉素抗性基因.下列叙述正确的是(  )

A. 图甲中的质粒用BamHⅠ切割后,含有4个游离的磷酸基团

B. 在构建重组质粒时,可用PstⅠ和BamHⅠ切割质粒和外源DNA

C. 导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长

D. 用PstⅠ和HindⅢ酶切,可以保证重组DNA序列的唯一性

 

D 【解析】 由图可知,目的基因中BamHⅠ识别序列在目的基因内部,故不能用BamHⅠ进行切割。可以选择PstⅠ或PstⅠ和BamHⅠ切割目的基因和载体。 图甲中的质粒用BamHⅠ切割后,会打开一个切口,故有2个游离的磷酸基团,A错误;在构建重组质粒时,不能用BamHⅠ切割质粒和外源DNA,会破坏目的基因,B错误;导入目的基因的大肠杆菌不能在含氨苄青霉素的培养基中生长,可以在含新霉素的培养基上生长,C错误;用PstⅠ和HindⅢ酶切,可以避免自身环化,保证重组DNA序列的唯一性,D正确。故选D。  
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考点分析:
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下表为常用的限制性核酸内切酶(限制酶)及其识别序列和切割位点,由此推断的以下说法中,正确的是(  )

(注:Y=C或T,R=A或G)

A. 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列

B. 限制酶切割后一定形成黏性末端

C. 不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相同的黏性末端

D. 限制酶的切割位点在识别序列内部

 

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为了增加菊花花色类型,研究者从其他植物中克隆出花色基因C(如图),拟将其与质粒(如图)重组,再借助农杆菌导入菊花中。下列操作与实验目的不符的是(  )

A. 用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和连接酶构建重组质粒

B. 用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织,将C基因导入细胞

C. 在培养基中添加卡那霉素,筛选被转化的菊花细胞

D. 用DNA分子杂交技术可以检测C基因是否导入到菊花细胞中

 

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下表为几种限制酶识别的序列和切割的位点。如下图,已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段(假设所用的酶均可将识别位点完全切开),下列各种酶切位点情况中,可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是(  )

限制酶

BamH Ⅰ

EcoR Ⅰ

Pst

识别序列和

切割位点

 

 

 

 

A. 1为EcoRⅠ,2为BamHⅠ,3为EcoRⅠ,4为Pst

B. 1为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为EcoRⅠ,4为Pst

C. 1为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为PstⅠ,4为EcoRⅠ

D. 1为EcoRⅠ, 2为PstⅠ, 3为PstⅠ,4为BamHⅠ

 

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下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述,正确的是(  )

A. Ti质粒与抗虫基因有互补的黏性末端,所以不用DNA连接酶可以直接拼接

B. ③侵染植物细胞后,重组Ti质粒整合到④的染色体上

C. ④的染色体上若含抗虫基因,则⑤就表现出抗虫性状

D. ⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异

 

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下图甲、乙、丙分别是目的基因、质粒载体、重组DNA(重组质粒)的三个示意图,限制酶有BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ。要获得理想的可表达目的基因的重组DNA,最佳的限制酶组合方式是(  )

A. 用EcoRⅠ切割目的基因和质粒载体

B. 用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和质粒载体

C. 用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体

D. 用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体

 

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