图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点,ampr表示氨苄青霉素抗性基因,neo表示新霉素抗性基因.下列叙述正确的是( )
A. 图甲中的质粒用BamHⅠ切割后,含有4个游离的磷酸基团
B. 在构建重组质粒时,可用PstⅠ和BamHⅠ切割质粒和外源DNA
C. 导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长
D. 用PstⅠ和HindⅢ酶切,可以保证重组DNA序列的唯一性
下表为常用的限制性核酸内切酶(限制酶)及其识别序列和切割位点,由此推断的以下说法中,正确的是( )
(注:Y=C或T,R=A或G)
A. 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
B. 限制酶切割后一定形成黏性末端
C. 不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相同的黏性末端
D. 限制酶的切割位点在识别序列内部
为了增加菊花花色类型,研究者从其他植物中克隆出花色基因C(如图),拟将其与质粒(如图)重组,再借助农杆菌导入菊花中。下列操作与实验目的不符的是( )
A. 用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和连接酶构建重组质粒
B. 用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织,将C基因导入细胞
C. 在培养基中添加卡那霉素,筛选被转化的菊花细胞
D. 用DNA分子杂交技术可以检测C基因是否导入到菊花细胞中
下表为几种限制酶识别的序列和切割的位点。如下图,已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段(假设所用的酶均可将识别位点完全切开),下列各种酶切位点情况中,可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是( )
限制酶 | BamH Ⅰ | EcoR Ⅰ | PstⅠ |
识别序列和 切割位点 |
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A. 1为EcoRⅠ,2为BamHⅠ,3为EcoRⅠ,4为PstⅠ
B. 1为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为EcoRⅠ,4为PstⅠ
C. 1为BamHⅠ,2为EcoRⅠ,3为PstⅠ,4为EcoRⅠ
D. 1为EcoRⅠ, 2为PstⅠ, 3为PstⅠ,4为BamHⅠ
下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述,正确的是( )
A. Ti质粒与抗虫基因有互补的黏性末端,所以不用DNA连接酶可以直接拼接
B. ③侵染植物细胞后,重组Ti质粒整合到④的染色体上
C. ④的染色体上若含抗虫基因,则⑤就表现出抗虫性状
D. ⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异
下图甲、乙、丙分别是目的基因、质粒载体、重组DNA(重组质粒)的三个示意图,限制酶有BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ。要获得理想的可表达目的基因的重组DNA,最佳的限制酶组合方式是( )
A. 用EcoRⅠ切割目的基因和质粒载体
B. 用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和质粒载体
C. 用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体
D. 用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体