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为培育出含β-胡萝卜素的“黄金大米”,科研人员提出以下两套培育方案。请分析回答下...

为培育出含β-胡萝卜素的“黄金大米”,科研人员提出以下两套培育方案。请分析回答下列问题。

(1)甲方案中,β-胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果的原因是__________。②过程中可用_____________技术检测水稻体细胞DNA上是否插入了β-胡萝卜素基因。

(2)乙方案中,在体细胞杂交前需要用_______法除去细胞壁获得原生质体,诱导其融合的化学试剂常用_________。杂交细胞形成的标志是_______________,与该过程密切相关的单层膜细胞器为____________

(3)通过⑤获得“黄金大米”幼苗过程中,除了在培养基中添加营养物质外,还需要添加___

(4)植物体细胞杂交在育种工作中具有广泛的应用价值,其突出的优点是可以___________

 

所有生物共用一套遗传密码 DNA分子杂交 酶解 聚乙二醇(或PEG) 杂种细胞再生出细胞壁 高尔基体 植物激素(生长素和细胞分裂素) 克服远缘杂交不亲和的障碍 【解析】 目的基因的检测和鉴定:检测目的基因是否导入受体细胞—DNA分子杂交法;检测目的基因是否成功转录—分子杂交法;检测目的基因是否表达出相应的蛋白质—抗原抗体杂交法。 植物体细胞杂交:指将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 甲方案通过基因工程把玉米的β-胡萝卜素基因导入水稻细胞,培育黄金大米;乙方案是通过植物体细胞杂交技术培育黄金大米。 (1)甲方案中,采用转基因技术培育黄金大米,由于所有生物共用一套密码子,故β-胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果。②过程中可用DNA分子杂交技术检测水稻体细胞DNA上是否插入了β-胡萝卜素基因,可以用分子杂交法检测目的基因是否转录。 (2)乙方案中即植物体细胞杂交技术,在体细胞杂交前需要用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁获得原生质体,可以用化学试剂聚乙二醇诱导原生质体的融合。杂交细胞形成的标志是再生出新的细胞壁,与细胞壁形成相关的细胞器是高尔基体。 (3)通过⑤植物组织培养获得“黄金大米”幼苗过程中,需要在培养基中添加营养物质、生长素、细胞分裂素等。 (4)植物体细胞杂交优点是克服远缘杂交不亲和的障碍。
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考点分析:
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如图为三种质粒和一个含目的基因的DNA片段,其中ApR为氨苄青霉素抗性基因,TcR为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因,EcoR Ⅰ(0.7 kb)Pvu Ⅰ(0.8 kb)等为限制酶切割位点,括号内的数据是该切点与复制原点的距离。已知1 kb1 000个碱基对,请回答下列问题:

(1)片段D为目的基因中的某一片段,则下列酶能形成或断裂图中②所示化学键的有_________(多选填字母)。

a、限制性核酸内切酶   bDNA连接酶 cTaq  d、解旋酶       eDNA水解酶

(2)若想获得大量的目的基因,可采用________法进行扩增,含目的基因的DNA片段共经过______次循环后刚好能形成等长的目的基因片段,复制n次需要提供特异性引物对______对。

(3)图中作为目的基因运载体最理想的质粒是________(填“A”“B”或“C”),请据图分析,其他两种质粒一般不能作为运载体的理由分别是________________________________

(4)用EcoR Ⅰ全酶切目的基因和质粒B形成的重组质粒,并进行电泳观察,可出现长度分别为1.1 kb______kb的两个片段,或者长度分别为_________的两个片段(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoR I的识别位点之间的碱基对忽略不计)。

(5)将分别用限制酶Pvu Ⅰ切开的质粒B溶液与目的基因溶液混合,加入DNA连接酶后,进行大肠杆菌受体细胞导入操作,则受体细胞的类型(对抗生素表现出抗性R或敏感性S,蓝白代表菌落颜色)包含________(多选填字母)。

AApR、蓝色   BApR、白色     CApS、蓝色        DApS、白色

 

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下列有关受精作用及胚胎发育的说法中,正确的是(  )

A. 防止多精入卵的两道屏障是顶体反应和透明带反应

B. 卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加

C. 桑椹胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化”

D. 卵子是否受精的标志是卵细胞膜和透明带之间是否出现两个极体

 

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关于体内受精的顺序,正确的是(  )

①释放第二极体②第一次卵裂开始③顶体反应④穿越透明带⑤雌、雄原核的形成

A. ④①③②⑤ B. ③④①⑤② C. ④⑤①②③ D. ③①④⑤②

 

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下列有关哺乳动物精子和卵细胞发生的叙述,正确的是(  )

A. 一个卵泡中能形成两到三个成熟的卵子

B. 精细胞内的其他物质浓缩为球体,叫做原生质滴,原生质滴中存在中心体

C. 不同种动物的精子的形态相似,大小略有不同,体型越大的动物精子越大

D. 成熟卵子的形成部位包括卵巢和输卵管

 

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“筛选”是生物工程中常用的技术手段,下列关于筛选的叙述错误的是(  )

A. 基因工程中通过标记基因筛选出的细胞不一定含重组质粒

B. 在小鼠胚胎细胞培养过程中,需要通过筛选才能获得具有无限分裂能力的细胞

C. 植物体细胞杂交过程中,原生质体融合后获得的细胞需要进行筛选

D. 单克隆抗体制备过程中,第二次筛选出的细胞既能无限增殖又能产特定抗体

 

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