Question

资料显示，中国每年约有13万新增宫颈癌病例，占全球新发病例的三分之一，其中约有8万女性去世。宫颈癌也是中国15岁至44岁女性中的第二大高发癌症。人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关，抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生，以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程，请据图回答下列问题：

(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有_________________________。

(2)对于抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀释法，即稀释细胞到3～10个/ mL，每孔加入细胞稀释液_____ mL，使每个孔内细胞一般不多于一个，达到单克隆培养的目的。

(3)由上述过程生产出的单克隆抗体一般不能直接用于人体，理由是____________________。

(4)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的制备单克隆抗体技术外，请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路。_______________________________________。

(5)利用蛋白质工程技术对抗HPV抗体进行改造以延长其体外保存的时间，其基本途径是从_________________出发，设计_________________，进一步推测应有的氨基酸序列，进而确定对应的脱氧核苷酸序列，据此获得相应基因。

Answer

动物细胞培养、动物细胞融合 0.1 小鼠形成的抗体对人体来说是抗原，存在着排异反应 通过基因工程向浆细胞中导入prG；(或：利用核移植技术将浆细胞的细胞核移植到去核的无限增殖细胞中) 预期蛋白质（抗HPV抗体）的功能 蛋白质（抗HPV抗体）的结构

【解析】

动物细胞融合指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂种细胞。

单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次用选择培养基筛选得到杂交瘤细胞；第二次用专一抗体检测得到能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。

（1）单克隆抗体制备过程中需要经过瘤细胞和浆细胞的融合及杂交瘤细胞的培养，故需要经过动物细胞培养和动物细胞的融合。

（2）对于抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀释法，即稀释细胞到3～10个/ mL，即每孔加入细胞稀释液0.1mL，使每个孔内细胞一般不多于一个，达到单克隆培养的目的。

（3）由于来自于小鼠的抗体对人体来说是抗原，存在着排异反应，故一般不能直接用于人体。

（4）科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG)，可以通过基因工程向浆细胞中导入prG，获得能无限增殖又可以产生特定抗体的浆细胞。

（5）蛋白质工程的基本途径：是从预期蛋白质功能出发，设计蛋白质的结构，进一步推测应有的氨基酸序列，进而确定对应的脱氧核苷酸序列，据此获得相应基因。