Question

为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1），拟将其与质粒（图 2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。

下列操作与实验目的不符的是

A. 用限制性核酸内切酶EcoRI和连接酶构建重组质粒

B. 用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞

C. 在培养基中添加卡那霉素，筛选被转化的菊花细胞

D. 用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上

Answer

C

【解析】

根据图示，在目的基因两端，启动子和终止子之间都有限制性核酸内切酶EcoRI的切点，因此可以用 EcoRI切割目的基因和运载体；农杆菌转化法适用于双子叶植物或裸子植物，菊花属于双子叶植物，可用农杆菌转化法，可将目的基因C导入到农杆菌的Ti质粒的T-DNA上，再用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞染色体的DNA上；质粒中只有潮霉素抗性基因，被转化的菊花细胞只对潮霉素具有抗性；目的基因分子水平上的检测方法有：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

A. 用限制性核酸内切酶EcoRI处理目的基因和质粒，可以使目的基因两侧和质粒产生相同的黏性末端，再用连接酶把切口连起来就能构建成重组质粒，A正确；

B. 农杆菌转化法适用于双子叶植物或裸子植物，菊花属于双子叶植物，故可用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞，B正确；

C. 图2中显示标记基因是潮霉素抗性基因，应该在培养基中添加潮霉素筛选被转化的菊花细胞，C错误；

D. 要检测转基因生物的染色体DNA是否插入目的基因，可采用DNA分子杂交技术，D正确。