Question

下列有关基因工程及其应用的说法中，正确的是

A. 可用限制酶切割烟草花叶病毒的核酸

B. 必须用相同限制酶处理目的基因和运载体

C. DNA连接酶连接DNA片段形成磷酸二酯键

D. 运载体上必须要有标记基因，用于筛选

Answer

C

【解析】

1、限制酶：主要从原核生物中分离纯化出来．特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来；（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（3）结果：形成黏性末端或平末端。

2、DNA连接酶：

（1）根据酶的来源不同分为两类：E．coliDNA连接酶、T4DNA连接酶．这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低；（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；（3）DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键；②DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来；③DNA连接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板。

3、运载体：（1）常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．（质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子）；（2）作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。

限制酶只能专一切割DNA，而烟草花叶病毒的核酸是RNA，所以不可用限制酶切割烟草花叶病毒的核酸，A错误；不同的限制性内切酶可能选择一样的DNA特定序列处进行切割，也能切出相同的黏性末端，所以不一定必须用相同限制酶处理目的基因和运载体，B错误；DNA连接酶连接具有相同末端的DNA片段形成磷酸二酯键，C正确；运载体上必须要有标记基因，用于检测目的基因是否导入受体细胞从而进行筛选，D错误，故选C。