Question

科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS)，继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠。流程如下：

(1)从黑鼠体内获得体细胞常需要用_______酶处理后，对其进行的初次培养称为________，培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为________。通入CO₂的目的是___________________。

(2)图中2－细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得，该过程称为________________；也可从灰鼠体内取出卵子，通过______________后进行早期胚胎培养获得。

(3)图中重组囊胚通过________技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用________方法保存。

(4)诱导因子的作用可能是___________________。

Answer

胰蛋白酶或胶原蛋白酶原代培养接触抑制维持培养液的pH冲卵(或冲胚)体外受精(或核移植)胚胎移植冷冻(或低温)促使体细胞恢复分裂增殖能力

【解析】

据图分析，从黑鼠体内获得体细胞后，脱分化形成多能干细胞；从灰鼠体内提取出2-细胞胚胎，经过特殊处理形成囊胚，将多能干细胞移植到囊胚的内细胞团，形成重组胚胎，移植到白鼠子宫，形成克隆鼠。

（1）从黑鼠体内获得体细胞常需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞进行培养。对其初次培养称为原代培养，培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为接触抑制。通入CO2的目的是维持培养液中的PH。

（2）将早期胚胎从小鼠输卵管或子宫冲洗出来的方法称为冲卵（或冲胚），也可以从灰鼠体内取出卵子，通过体外受精（或核移植）后进行早期胚胎培养获得。

（3）囊胚通过胚胎移植技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用液氮冷冻（或低温）保存。

（4）诱导因子的作用可能是促使体细胞恢复分裂增殖能力，与植物组织培养中的脱分化过程类似。