Question

某纺织厂为使牛仔布呈现“穿旧”效果，准备用纤维素分解菌处理代替传统的浮石擦洗。工作人员拟从土壤样品中分离该类微生物，并进行扩大培养，相关工艺流程如图。请回答下列问题：

（1）进行土样中细菌数量的测定，常用稀释涂布平板法（选用10⁴～10⁶倍的稀释液）统计样品中活菌的数量。但第一次用稀释涂布平板法测定土样中纤维素分解菌的数量时，所进行实验的一般基本思路是______。

（2）在系列稀释操作前，“选择培养”的一般目的是______。

（3）“涂布接种”时，转动培养皿的目的是______。

（4）在鉴别培养基上，菌落周围的透明圈大小可能与纤维素酶的______有关。在分离出所需的菌株之后，还应通过______的实验来进一步确定分离出的菌株是纤维素分解菌，而后开展扩大培养。

（5）纤维素酶的测定方法一般是______。

Answer

将稀释范围适当放宽的稀释液，采用稀释涂布平板法分别接种的鉴别培养基（用CR染色），以保证从中选择出菌落数在30-300的平板进行计数 以确保能够从样品中分离得到所需要的微生物，增加纤维素分解菌的数量 使菌液分布均匀 量和活性 发酵产纤维素酶 对纤维素酶分解滤纸等纤维素后产生的葡萄糖进行定量测定

【解析】

据图分析可知，采用稀释涂布分离法对纤维素分解菌进行分离和培养；纤维素分解菌的鉴别可以使用刚果红染液，在纤维素分解菌的菌落周围会出现透明圈，而培养基的其他地方呈红色。

（1）第一次用稀释涂布平板法测定土样中纤维素分解菌的数量时，需要将稀释范围适当放宽的稀释液，采用稀释涂布平板法分别接种的鉴别培养基（用CR染色），以保证从中选择出菌落数在30-300的平板进行计数。

（2）选择培养的目的是确保能够从样品中分离得到所需要的纤维素分解菌，增加纤维素分解菌的数量。

（3）“涂布接种”时，转动培养皿的目的是使菌液分布均匀。

（4）该实验中的透明圈的大小与纤维素酶的量和活性有关。在分离出所需的菌株之后，还应通过发酵产纤维素酶实验来进一步确定分离出的菌株是纤维素分解菌，而后开展扩大培养。

（5）纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后产生的葡萄糖进行定量测定。