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口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种动物传染病,目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的...

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种动物传染病,目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VPl。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗。请回答下列问题:

(l)如图是VP1基因、农杆菌T1质粒结构示意图,若用以构建具有VP1基因的基因表达载体,还需要在质粒中插入__

(2)口蹄疫病毒的遗传物质为RNA,则获得可重组到质粒的VPI基因必须用到_____酶。要获得大量该VP1基因,可利用___技术进行扩增。

(3)通常用BamH I、HindIII两种限制酶切割VP1基因和T1质粒的目的是___:要筛选出含有该目的基因表达载体的农杆菌,首先需要在含____的培养基上进行。

(4)VP1基因应插入到农杆菌T1质粒的T-DNA上,通过转化作用进入番茄细胞并插入到_____,使VP1基因能够稳定存在并发挥作用。

(5)获得表达VP1蛋白的番茄植株以后,要进行免疫效力的测定,具体方法是:将从转基因番茄叶片中提取的VPI蛋白质注射到一定数量的豚鼠体内,每半个月注射一次,三次注射后检测豚鼠血液中产生的____数量,为了使结果可信,应设置空白对照组,注射___

 

启动子 逆转录 PCR 防止VP1基因、Ti质粒的自身环化 卡那霉素 染色体DNA VP1蛋白的抗体 等量生理盐水 【解析】试题基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 (1)构建具有VP1基因的基因表达载体还需要在质粒中插入启动子,启动子是RNA聚合酶的结合位点,能启动转录过程。 (2)口蹄疫病毒的遗传物质为RNA,可以以RNA为模板逆转录获得VPI基因;PCR技术可在体外大量扩增目的基因。 (3)用限制酶BamHⅠ、HindⅢ切割出的末端完全不同,这样可以防止目的基因、运载体自身环化,也能防止目的基因和运载体反向连接,即可以保证目的基因和质粒的定向连接;由图可知,标记基因是卡那霉素抗性基因,因此要筛选出含有该目的基因表达载体的番茄细胞,首先需要在含卡那霉素的培养基上进行。 (4)VP1基因应插入到农杆菌Ti质粒的T-DNA上,通过转化作用进入番茄细胞并插入到染色体DNA,使VP1基因能够稳定维持并发挥作用。 (5)获得表达VP1蛋白的番茄植株以后,要进行免疫效力的测定,具体方法是:将从转基因番茄叶片中提取的VP1蛋白质注射到一定数量的豚鼠体内,每半个月注射一次,三次注射后检测豚鼠血液中产生的VP1蛋白的抗体数量,为了使结果可信,应设置空白对照组,注射VP1蛋白的抗体等量生理盐水。  
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常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵,而自然界中某些酵母菌能利用酶A分解木糖产生酒精。请分析回答下列问题:

(1)在制备含琼脂的培养基和倒平板的过程中,下列选项需要的是________(填序号)。

①酒精灯    ②接种环    ③高压蒸汽灭菌锅    ④培养皿

(2)将自然界收集的酵母菌菌株转接到仅以______为碳源的培养基中,_______(填“有氧”或“无氧”)条件下培养一周后,有些酵母菌死亡,说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。

(3)将搜集到的酵母菌放入培养液中扩大培养后,用稀释涂布平板法计算每克样品中的菌株数的公式为(C÷V)×M,其中C代表______。对于需要长期保存的菌种,可以采用___________的方法。           

(4)纯化后的酶A可以用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下,带电荷相同的蛋白质电泳速度越快,说明_____________。       

(5)生产上常将酶A固定化以反复利用。部分操作如下:将酶A固定在_______(“溶于水”或“不溶于水”)的载体上,将其装入反应柱内后,需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱,以除去未吸附的酶 A。一般来说,酶不适合采用__________法固定化。

 

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科研工作者利用某二倍体植物进行实验。该植物的紫株和绿株由 6 号常染色体上一对等位基因(D、d)控制。正常情况下,紫株与绿株杂交,子代均为紫株。育种工作者用 X 射线照射紫株A后,再与绿株杂交,发现子代有紫株832株,绿株1株(绿株B)。为研究绿株B出现的原因,又做了下图所示的杂交实验。请分析回答下列问题:

(1)假设一:X 射线照射紫株A导致其发生了基因突变。若此假设成立,则图一杂交实验中,F1 的基因型是_____,F2 中紫株所占的比例应为_____

(2)假设二:X 射线照射紫株A导致其6号染色体断裂,含有基因 D的片段缺失(注:一条染色体片段缺失不影响个体生存,两条同源染色体缺失相同的片段个体死亡)。若此假设成立,则图一杂交实验中,绿株B能产生_____种配子,F1 自交得到的F2 中,紫株所占比例应为_____

(3)用显微镜观察该植物花粉母细胞的减数分裂时,发现一对染色体联会后出现图二所示的“拱形”结构,则它可能属于染色体结构变异中的_____________(选填“缺失”、“重复”、“易位”或“倒位”) 类型。

 

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如图(a)为某弃耕的农田生态系统的局部能量流动示意图(字母表示能量的多少),图(b)表示某种群迁入该生态系统一段时间内,种群密度对种群的出生率和死亡率的影响。请回答下列问题:

 

(1)第一营养级与第二营养级之间的能量传递效率为_____。图中d表示_____的能量,生态系统的能量不循环流动的原因是_________;第三营养级每增加50千克,至少需要生产者_____千克。

(2)由图(b)可知,种群密度在_____点时,种群数量的净增长量最大;当种群密度从A~E变化的过程中,种群中成年个体平均重量的变化趋势是_____

(3)若该地区气候条件适宜,经过数十年,该生态系统的结构越来越复杂,在该过程中,生产者吸收的CO2_____(填“大于”“小于”或“等于”)整个生物群落排出的CO2 量。

 

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现代人的生活节奏快,压力大。如图(a)为下丘脑的部分功能的示意图,图(b)为压力对人体部分器官的影响。分析图形,回答下列问题:

(1)若已知图(a)中的突触前膜释放的是兴奋性递质,则在a处给予适宜的刺激,b处电流计会发生_____次偏转。分析图(b)可知,人体因为情绪产生压力的调节属于_____调节。

(2)下丘脑对激素e分泌的调节与对甲状腺激素分泌的调节类似,由此推断图 (b)中缺少_____(描述出起点和终点)的箭头,图(b)中的(二)应填________(填“长”或“短”)。

(3)研究发现,在压力长期得不到缓解的情况下,人体免疫力会有所下降,可能的原因是激素e能抑制_________的合成和释放,从而使B细胞的________受阻。

(4)图中各器官细胞中的mRNA,可以与生长激素基因形成杂交分子的是____________

 

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莲藕是被广泛用于观赏和食用的植物。研究人员通过人工诱变筛选出一株莲藕突变体,其叶绿素含量仅为普通莲藕的 56%。图1表示在25℃时不同光照强度下该突变体和普通莲藕的净光合速率。图 2 中 A、B 表示某光照强度下该突变体与普通莲藕的气孔导度(单位时间进入叶片单位面积的CO2 量)和胞间CO2浓度。

(1)藕极易褐变,这是细胞内的多酚氧化酶催化相关反应引起的。将藕在开水中焯过后可减轻褐变程度,原因是_____________。藕的气腔孔与叶柄中的气腔孔相通,因此藕主要进行_____呼吸。在藕采收的前几天,向藕田灌水并割去荷叶的叶柄,有利于_________,提高藕的品质。

(2)图1中光照强度低于a时,突变体莲藕的净光合速率低于普通莲藕,据题意推测引起这种差异的主要原因是_____,导致相关反应减弱。

(3)据图2分析,_____(普通/突变体)莲藕在单位时间内固定的CO2多,理由是__________。可以推测图2是在图1中_____(填“>a”“=a”)时的光照强度下测得的结果。

(4)图1中,大于a点的光照强度时,与普通莲藕相比,突变体莲藕虽叶绿素含量少,却具有较高的净光合速率,其可能的原因是_________________________________________ (写出一点即可)。

 

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