如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1→2→3→4→5．整个划线过程中需要对接种环进行灼烧的次数为（ ）
A. 2 B. 4 C. 5 D. 6
下列有关土壤中微生物的分离与计数的说法中,错误的是
A. 因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离
B. 测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同
C. 如果得到了3个或3个以上菌落数目在30~300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数
D. 牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落
用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照实验，对于对照组的要求不包括以下哪项( )
A. 对照组培养基也严格灭菌，且不接种任何微生物
B. 对照组和实验组培养基放在相同条件下培养
C. 所用培养基成分及pH大小完全与实验组一致
D. 培养基的量的大小与实验组必须绝对相同
在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是
A. 葡萄汁装瓶时，不留空间以便酵母菌无氧呼吸
B. 将发酵装置放在20℃左右的环境中，适合酵母菌
C. 定期向发酵装置通入无菌空气，便于酵母菌有氧呼吸
D. 定期打开发酵瓶瓶盖进行放气，防止发酵瓶爆炸
口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种动物传染病，目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VPl。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗。请回答下列问题：
(l)如图是VP1基因、农杆菌T1质粒结构示意图，若用以构建具有VP1基因的基因表达载体，还需要在质粒中插入__。
(2)口蹄疫病毒的遗传物质为RNA，则获得可重组到质粒的VPI基因必须用到_____酶。要获得大量该VP1基因，可利用___技术进行扩增。
(3)通常用BamH I、HindIII两种限制酶切割VP1基因和T1质粒的目的是___：要筛选出含有该目的基因表达载体的农杆菌，首先需要在含____的培养基上进行。
(4)VP1基因应插入到农杆菌T1质粒的T-DNA上，通过转化作用进入番茄细胞并插入到_____，使VP1基因能够稳定存在并发挥作用。
(5)获得表达VP1蛋白的番茄植株以后，要进行免疫效力的测定，具体方法是：将从转基因番茄叶片中提取的VPI蛋白质注射到一定数量的豚鼠体内，每半个月注射一次，三次注射后检测豚鼠血液中产生的____数量，为了使结果可信，应设置空白对照组，注射___。
常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能利用酶A分解木糖产生酒精。请分析回答下列问题：
（1）在制备含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项需要的是________（填序号）。
①酒精灯 ②接种环 ③高压蒸汽灭菌锅 ④培养皿
（2）将自然界收集的酵母菌菌株转接到仅以______为碳源的培养基中，_______（填“有氧”或“无氧”）条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。
（3）将搜集到的酵母菌放入培养液中扩大培养后，用稀释涂布平板法计算每克样品中的菌株数的公式为（C÷V）×M，其中C代表______。对于需要长期保存的菌种，可以采用___________的方法。
（4）纯化后的酶A可以用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明_____________。
（5）生产上常将酶A固定化以反复利用。部分操作如下：将酶A固定在_______（“溶于水”或“不溶于水”）的载体上，将其装入反应柱内后，需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱，以除去未吸附的酶 A。一般来说，酶不适合采用__________法固定化。
