Question

某化工厂的污水池中；含有一种有害的、难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示，请分析回答问题：

（1）加入化合物A的培养基属于__________培养基，目的菌生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的______________________________。

（2）转为固体培养时，常采用平板划线的方法接种，获得单菌落后继续筛选，在每次划线之前都要灼烧接种环，目的是__________________________________________________。

（3）某同学计划统计污水池中目的菌的总数，他选用10⁴、10⁵、10⁶的稀释液进行平板培养，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看还应该设置哪些对照实验在相同条件下同时培养？_______________________________________________________________________________________。

（4）在农业生产研究中，常需要进行微生物的培养和计数。下图是利用平板划线法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，为达到这一目的，操作上应注意。

①____________________________________________________________________。

②____________________________________________________________________。

③_____________________________________________________________________。

Answer

选择 化合物A 杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种 不接种的空白培养基，证明培养基制备是否合格(是否被杂菌污染) 每次划线前要灼烧接种环 冷却后从上一区划线末端开始划 首尾区不重叠

【解析】

根据题意分析可知：该实验的目的是筛选出高效降解化合物A的细菌，在以化合物A为唯一碳源的培养基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A为碳源和氮源生长繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，无法生长繁殖；分解化合物A的微生物是需氧微生物，因此在培养过程中应该震荡培养，增加培养液中的溶氧量满足微生物对氧气的需求。实验结束时应该将使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，防止污染环境。

（1）据分析知，加入化合物A的培养基属于选择培养基，目的菌生长所需的氮源和碳源都是来自培养基中的化合物A。

（2）平板划线法接种，是通过划线逐步稀释，最后获得单菌落的方法，所以在每次划线之前都要灼烧接种环，以便杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种。

（3）为了证明培养基制备是合格的，没有被杂菌污，还应该设置不接种的空白培养基作为对照。

（4）想要把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，操作上应注意：①每次划线前要灼烧接种环以便杀死接种环上残留的细菌；②上一区域末端菌体数最少，所以冷却后从上一区划线末端开始划；③尾区已经充分稀释，所以不能与首区重叠。