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制备单克隆抗体过程中,需要从众多融合和未融合的细胞中筛选出杂交瘤细胞,到底怎样筛...

制备单克隆抗体过程中,需要从众多融合和未融合的细胞中筛选出杂交瘤细胞,到底怎样筛选呢?请分析资料,回答下列问题:

资料1:细胞内DNA合成一般有两条途径,即起始合成途径和中间合成途径,其中起始合成途径需要叶酸作为一种必需的辅酶参与。

资料2:氨基蝶呤是叶酸的拮抗剂,可以阻断叶酸的形成。融合实验中使用的骨髓瘤细胞是中间合成途径缺失株,只有起始合成途径。浆细胞不增殖,但有两条DNA合成途径。

(1)根据上述资料分析,需要向经过促融处理后的各种细胞混合培养物中加入_______,可使___________不能分裂,从而筛选出唯一能增殖的___________

(2)上述筛选到的细胞要置于多孔细胞培养板的每一个孔中进行随后的培养。转移前,通常要将培养细胞稀释到7~10个/mL,每孔中加入0.1mL,这样做的目的是___________,单克隆抗体最主要的优点是_____________________________

(3)若利用生产的单克隆抗体治疗相关病毒(抗原)的感染性疾病,请提出相关的治疗思路:____

 

氨基蝶呤 骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞自我融合细胞 杂交瘤细胞 让每个孔中的杂交瘤细胞数量不超过一个(或只有一个杂交瘤细胞) 特异性强、灵敏度高、可大量制备 单克隆抗体上连接抗病毒药物制成靶向药物给患者注射(或利用单克隆抗体作为药物给患者注射) 【解析】 据题文描述可知:本题考查学生对生产单克隆抗体的相关知识的识记和理解能力,以及获取信息、分析问题的能力。 (1)依题意可知:细胞内DNA合成一般有起始合成途径和中间合成途径,其中起始合成途径需要叶酸作为一种必需的辅酶参与,而氨基蝶呤是叶酸的拮抗剂,可以阻断叶酸的形成。融合实验中使用的骨髓瘤细胞只有起始合成途径,浆细胞不增殖,但有两条DNA合成途径。可见,向经过促融处理后的各种细胞混合培养物中加入氨基蝶呤,可使骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞自我融合的细胞不能分裂,从而筛选出唯一能增殖的由骨髓瘤细胞与浆细胞融合而成的杂交瘤细胞。 (2) 将筛选出的杂交瘤细胞稀释到7~10个细胞/mL,每孔中加入0.1mL细胞稀释液,其目的是:让每个孔中的杂交瘤细胞数量不超过一个(或只有一个杂交瘤细胞),从而将产生特定抗体的杂交瘤细胞筛选出来,进而使得到的抗体纯度更高。单克隆抗体最主要的优点是:特异性强、灵敏度高、可大量制备。 (3) 若利用生产的单克隆抗体治疗相关病毒(抗原)的感染性疾病,则可依据抗体与抗原进行特异性结合的原理,将单克隆抗体与抗病毒药物相结合,制成靶向药物,给患者注射(或利用单克隆抗体作为药物给患者注射)。
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考点分析:
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(3)莴苣为双子叶植物,常用农杆菌转化法培育转基因莴苣。农杆菌的作用是______________,转化的实质是__________________(填变异类型)。

(4)过程⑥常用的方法是用________来处理大肠杆菌,使细胞处于一种______生理状态。

 

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