Question

以下过程是制备固定化酵母细胞的实验步骤，请回答：

实验步骤：酵母细胞的活化→配制CaCl₂溶液→配制海藻酸钠溶液→步骤④→固定化酵母菌细胞

（1）上述步骤中，步骤④是将海藻酸钠溶液与_________混合。该实验中CaCl₂溶液的作用是___________。

（2）配制的海藻酸钠溶液的浓度要适宜，如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目___________。另外，配置的海藻酸钠溶液的过程中，要使用小火或者间断加热，目的是___________。

（3）与固定化酶相比，固定化细胞技术一般采用包埋法固定，原因是___________。

Answer

酵母细胞 使海藻酸钠形成凝胶珠（或答氯化钙是凝固剂） 较少 防止海藻酸钠焦糊 细胞个体大，不易从包埋材料中漏出

【解析】

1、采用包埋法制备固定酵母细胞的主要步骤：酵母细胞的活化（利用蒸馏水使干酵母恢复正常生活状态）→海藻酸钠、CaCl2溶液的配制（在溶解海藻酸钠溶液的过程中使用小火或间断加热，防止溶液焦糊）→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合（注意冷却海藻酸钠溶液至室温，防止高温破坏酵母菌的活性）→固定化酵母细胞。

2、活化是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。

3、凝胶珠的颜色和形状：如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。

4、刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便Ca2+与Na+充分交换，形成的凝胶珠稳定。

（1）步骤④是将海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合。该实验中CaCl2溶液的作用是：使海藻酸钠形成凝胶珠（或答氯化钙是凝固剂）。

（2）如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠颜色过浅，所包埋的酵母细胞数目较少；海藻酸钠溶化过程要小火加热(小火间断加热)不断搅拌，使海藻酸钠完全溶化，又不会焦糊。

（3）细胞个体大，难以吸附或结合，而且不易从包埋材料中漏出，则固定化细胞一般采用包埋法固定。