Question

果胶酶的应用领域非常广泛，它存在于各种微生物中。为获得土壤中果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定和酶的工业生产等工作。

（1）实验过程中，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是:A______、B_______。用此配方进行选择培养，目的是__________________________ 。

成分	K2HPO4	MgSO4	NaNO3	FeSO4	A	琼脂	B
添加量	0.1g	0.5g	3g	0.01g	2g	15g	定容至1L

（2）为在培养基表面形成单个菌落，以接种环为工具，则用______法进行接种。灼烧接种环之后，要等冷却才可继续操作，理由是：_____________。

（3）完善“探究果胶酶的最适用量”的实验方案：向分别盛有1.0、1.5、2.0……4.0mL2%果胶酶溶液的一组试管内同时加入5mL苹果泥，__________________________，适温水浴30分钟后，过滤每支试管的反应液，比较滤出的果汁体积或_____________________。

（4）当果胶酶与苹果泥混合在一起时，酶很难回收，不能再次利用，还可能影响了产品的质量。科研人员认为引进_______________技术，可解决生产中遇到的这些问题了。

Answer

果胶 蒸馏水 增加果胶酶产生菌的浓度，确保能分离到所需的微生物 平板划线 温度降低，才不会杀死菌种（或“避免温度过高，杀死菌种”） 用蒸馏水定容（调节）到10mL（相同体积） 澄清度 固定化酶

【解析】

微生物的分离是研究和利用微生物的第一步，也是微生物工作的基本方法和重要环节；土壤中的微生物很多，本题中要从土壤中获得果胶酶高产菌株；接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，其中后者还可以用于菌种的计数。

（1）根据表格分析，B用于定容，为蒸馏水；该培养基用于获得土壤中果胶酶高产菌株，因此A应该是果胶。用此配方进行选择培养，目的是增加果胶酶产生菌的浓度，确保能分离到所需的微生物。

（2）微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，其中平板划线法需要使用接种环，且接种环灼烧灭菌后需要冷却至室温才能继续划线，以防止温度过高，杀死菌种。

（3）实验的目的是探究果胶酶的最适用量，实验方案为：向分别盛有1.0、1.5、2.0……4.0mL2%果胶酶溶液的一组试管内同时加入5mL苹果泥，用蒸馏水定容到10mL，适温水浴30分钟后，过滤每支试管的反应液，比较滤出的果汁体积或澄清度。

（4）根据题意分析，果胶酶与苹果泥混合在一起时，酶很难回收，不能再次利用，还可能影响了产品的质量，而固定化酶技术可以让产物与酶分离，使得酶可以反复使用，且提高了产品的品质。