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用噬菌体抗体库技术获得人的单克隆抗体的方法是:将人抗体基因插入噬菌体载体,然后让...

用噬菌体抗体库技术获得人的单克隆抗体的方法是:将人抗体基因插入噬菌体载体,然后让该噬菌体感染大肠杆菌,抗体可能和噬菌体蛋白以融合蛋白的形式附着在噬菌体表面,也可能通过大肠杆菌分泌出去。回答下列问题:

(1)获取人抗体基因时,可从人的_________细胞中获取总RNA,反(逆)转录成cDNA,再通过PCR技术扩增抗体基因。在PCR反应体系中,需加入________作为合成DNA的原料。

(2)在抗体基因与噬菌体基因之间设计了一个终止密码子(UAA或UAG或UGA)的对应序列,在终止密码子突变型的菌株表达时,抗体基因的表达产物是_______(填“融合蛋白”或“分泌型抗体”)。

(3)下图表示噬菌体抗体库中编码某抗体的mRNA的部分碱基序列:

图中虚线框内mRNA片段包含__________个密码子,如虚线框后的序列未知,预测虚线框后的第一个密码子最多有________种。

(4)在噬菌体抗体库的构建过程中,理论上可以不利用Ca2+处理大肠杆菌,依据是___________。与利用杂交瘤技术生产的单克隆抗体相比,用该技术省去的步骤是__________,使制备更简单易行。从噬菌体抗体库中筛选特异性抗体的方法是__________

 

浆 四种脱氧核苷酸 融合蛋白 8 13 噬菌体可以侵染大肠杆菌,将重组DNA分子注入大肠杆菌 动物细胞融合(或已免疫的B细胞与骨髓瘤细胞融合或浆细胞与骨髓瘤细胞融合) 抗原—抗体杂交(法) 【解析】 本题主要考查基因工程和细胞工程与单克隆抗体制备的相关知识,要求学生熟知基因工程的操作过程、以及单克隆抗体的制备的过程,旨在考查考生的理解能力与知识的综合运用能力。 (1)抗体基因在效应B细胞(浆细胞)中表达,故应从人的浆细胞中获取总RNA,反(逆)转录成cDNA,再通过PCR技术扩增抗体基因;DNA的原料为四种脱氧核苷酸; (2)在抗体基因与噬菌体基因之间设计了一个终止密码子(UAG)的对应序列,终止密码子为翻译的终点,由于终止密码子突变型菌株转录的产物无原来设计的终止密码子,因此抗体基因的表达产物是融合蛋白(抗体和噬菌体的蛋白质); (3)mRNA上三个相邻碱基为一个密码子,故图中虚线框内mRNA片段包含8个密码子;该片段后面的第一个碱基为U,所以后面的密码子最多可能为4×4=16种,根据题干信息及题中给出的mRNA序列可知,虚线框后第一个密码子不可能是终止密码子,故实际上最多有16-3=13种密码子; (4)Ca2+处理大肠杆菌的目的是使大肠杆菌易于吸收周围环境中的DNA分子,但由于噬菌体可以侵染大肠杆菌,可将重组DNA分子注入大肠杆菌,因此在噬菌体抗体库的构建过程中,理论上可以不利用Ca2+处理大肠杆菌;利用杂交瘤技术生产的单克降抗体,需要对骨髓瘤细胞和B淋巴细胞进行融合,然后筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,但用噬菌体抗体库技术获得人的单克隆抗体省去了动物细胞融合环节,使制备更简单易行;从噬菌体抗体库中筛选特异性抗体的方法是抗原—抗体杂交(法)。
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分离筛选降解纤维素能力强的微生物,对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有重要意义。研究人员用纤维素、硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、KCl、酵母膏以及水解酪素配制的培养基,成功筛选出能产生纤维素酶的微生物。回答下列问题:

(1)有些微生物能降解纤维素,有些微生物则不能,原因是前者能产生_____,一般认为它至少包括三种组分,即_________

(2)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的________,及时对培养基进行分装,并进行___________灭菌法灭菌。

(3)用来筛选降解纤维素的微生物的培养基含有硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、其作用是_______________。(答出两点即可)

(4)为在培养基表面形成单个菌落,若用稀释涂布平板法进行接种,在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多,原因是_________。若用平板划线法进行接种,在第二次以及其后的划线操作时,需要从上一次划线的末端开始划线,原因是__________

 

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某水稻的宽叶(A)对窄叶(a)为显性,花粉粒非糯性(E)对花粉粒糯性(e)为显性,花粉粒长形(R)对圆形(r)为显性。非糯性花粉遇碘变蓝黑色,糯性花粉遇碘呈橙红色,现用品种甲(aaeerr)、乙(aaEERR)、丙(AAeeRR)、丁(AAEErr)进行杂交实验。回答下列问题:

(1)若三对基因独立遗传,甲与丁的杂交后代产生的配子基因型及比例为_________。若利用花粉鉴定法来验证基因自由组合定律,可选用的亲本组合为__________________

(2)为探究基因R、r和A、a的位置关系,研究人员做了以下杂交实验:让甲与丙杂交产生F1,F1与甲回交,观察并统计后代的表现型及比例。请写出可能的实验结果与评论(不考虑交叉互换):____________

(3)除以上让F1与甲回交的方法外,还可采用_______的方法探究基因R、r和A、a的位置关系,请写出可能的结果与结论:_________

 

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回答下列有关生态系统的问题:

(1)当烟草叶受到某种蛾幼虫的刺激后,会释放出能吸引该种蛾幼虫天敌的挥发性物质,烟草释放的这种物质属于_________信息,这体现了信息传递在生态系统中的作用是____________

(2)一条食物链中,各营养级同化能量的共同去向有___________

(3)废弃的农田演替至草本和灌木混生阶段时,与初始阶段相比,一年生草本植物的数量大幅度减少,其原因是_______________

(4)与农田生态系统相比,森林生态系统的自我调节能力较强,其主要原因是________

 

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下图中①~③表示刺激S引起的人体调节过程,X是参与调节的重要器官。回答下列问题:

(1)若刺激S为血糖浓度的变化,则刺激胰岛B细胞分泌胰岛素的信号有_________,以及器官X支配的神经分泌的________________

(2)某糖尿病患者体内调节血糖的相关激素水平正常,则该患者血糖浓度较高的原因最可能是___________

(3)若刺激S为寒冷,器官X分泌的促甲状腺激素释放激素与甲状腺分泌的甲状腺激素,在垂体分泌促甲状腺激素过程中可表现出___________作用,从免疫学角度分析,桥本氏甲亢属于________病。

 

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图1为水稻叶肉细胞内发生的变化,其中A~D表示生理过程的不同阶段,a~f表示物质;图2表示该水稻叶肉细胞光合作用、呼吸作用与温度的关系。回答下列问题:

(1)图1中,过程B为过程A提供的物质为_______,a~f所表示的物质相同的是_______(填字母)。白天时,水稻叶肉细胞中消耗[H]的场所为_________

(2)由图2可知,光合作用与呼吸作用有关的酶对温度较为敏感的是______有关的酶,净光合作用的最适温度约为__________

(3)若将该水稻植株长期置于45℃左右,该水稻植株________(填“能”或“不能”)正常生长,其原因____________________________________________________________________

 

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