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人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种糖蛋白,具有很高的药用价值,可以通过生物工...

人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种糖蛋白,具有很高的药用价值,可以通过生物工程大量生产。下图为含htPA基因的表达载体。请回答下列相关问题:

(1)限制酶主要是从________中获得,其特点是能够识别DNA分子的_________,并在特定位点切割DNA。质粒DNA分子上有一个至多个限制酶切位点,其作用是______

(2)构建基因组文库是获取目的基因的常用方法,与基因组文库相比,cDNA文库的基因数相对要少,原因是________

(3)作为受体细胞的酵母茵缺失URA3基因,必须在含有尿嘧啶的培养基中才能存活,因此,图示表达载体上的URA3基因可作为____,供鉴定和选择;为了筛选出成功导入表达载体的酵母菌,所使用的培养基____(填“需要”“不需要”)添加尿嘧啶。

(4)若要在羊乳中获得htPA,为了获得转基因母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行________。若在转htPA基因羊的羊乳中检测到____,说明目的基因成功表达。

 

原核生物(或微生物) 特定的(脱氧)核苷酸序列 供外源DNA片段(基因)插入 cDNA文库只能收集到生物发育到某时期已发生转录的基因,(而基因组文库能收集到全部基因) 标记基因 不需要 性别鉴定 htPA(或人组织纤溶酶原激活物) 【解析】 1、DNA重组技术至少需要三种工具:限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶、运载体。2、目的基因分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。 3、该基因工程需要对羊的性别进行选择,由于只有母羊能够分泌乳汁,因此选择母羊的胚胎进行移植。 (1)限制酶主要是从原核生物(或原核细胞)中分离纯化出来的。每一种限制性酶可以识别特定的(脱氧)核苷酸序列。质粒DNA分子可用作载体,其上有一个至多个限制酶切位点,其作用是供外源DNA片段(基因)插入。 (2)cDNA文库只能收集到生物发育到某时期已发生转录的基因,(而基因组文库能收集到全部基因)故与基因组文库相比,cDNA文库的基因数相对要少。 (3)图示表达载体上的URA3基因可作为标记基因,供鉴定和选择;由于缺失URA3基因的酵母菌必须在含有尿嘧啶的培养基中才能存活,重组质粒中含有URA3基因,为了筛选出成功导入表达载体的酵母菌,即所使用的培养基不需要添加尿嘧啶,如果能存活,说明导入成功;如不能存活,说明没有成功。 (4)只有母羊能分泌乳汁,为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定;若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到htPA(或人组织纤溶酶原激活物),说明目的基因成功表达。
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生物兴趣小组自制了泡菜,对其中的微生物进行了筛选,并对有害物质的含量进行了测定,请回答相关问题:

(l)泡菜制作过程中,乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行_________的过程。乳酸菌中含有多种蛋白质,利用凝胶色谱法分离提取到的部分乳酸菌蛋白质时,等样品完全进入凝胶层后,加入pH为7.0、浓度为20mmol/L的____    到适当高度进行洗脱,结果先洗脱出来的是_________的蛋白质。

(2)兴趣小组还用伊红美蓝培养基检测泡菜汁中大肠杆菌的含量。从物理性质看,该培养基属于____(液体/固体)培养基,伊红美蓝对大肠杆菌起到____(选择/鉴别)作用。在某次计数操作过程中,发现培养基上的菌落连成一片,为避免此种现象发生,正确的操作方法是________

(3)培养大肠杆菌时,在接种前通常需要检测培养基是否被污染,检测方法是____

(4)测定泡菜中NaNO2的含量,依据的原理是在______条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成________.色染料。

 

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果蝇的气门部分缺失和正常气门是一对相对性状,相关基因位于常染色体上(用A、a表示)。请回答相关问题:

(1)具有上述相对性状的一对纯合果蝇杂交,F1全部为气门部分缺失,F1相互杂交产生的F2中正常气门个体占1/4,说明该对相对性状的遗传符合_________定律。

(2)某小组选择一只气门部分缺失果蝇和多只正常气门果蝇杂交,发现Fi中正常气门个体均约占1/6。从变异来源推测出现该结果最可能的原因是____(填序号)。

①基因突变    ②基因重组    ③染色体结构变异    ④染色体数目变异

(3)果蝇的第Ⅳ号染色体为常染色体,多1条(Ⅳ号三体)或者少l条(Ⅳ号单体)都可以生活,而且还能繁殖后代,而W号染色体缺2条的受精卵不能发育。为探究A、a基因是否在第Ⅳ号染色体上,A同学将某气门部分缺失的雄蝇(染色体正常)与气门正常的Ⅳ号单体雌蝇杂交,子代雌雄均出现气门部分缺失:气门正常=l:1。A同学据此判断A、a基因位于Ⅳ号染色体上。

①A同学的判断不一定正确,原因是____

②请以A同学杂交实验的子代为材料,写出进一步探究的思路,并预期结果和结论____

 

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林窗主要是指森林群落中老龄树死亡或因偶然因素(如火灾、龙卷风等)导致成熟阶段优势种的死亡,从而在林冠层造成空窗的现象。生态学家对某林窗的生态变化进行了研究,请回答下列问题:

(l)判断该林窗内的群落演替为次生演替,依据是 _____________随着时间的推移,艾蒿、紫荆的种群密度逐渐下降,原因是____

(2)在调查上述物种的种群密度时,为减少误差应注意________。若用标志重捕法调查林窗内林鼠的种群密度,所得数据往往比实际结果偏大,可能的原因有 _____(列举两项)。

(3)在研究该林窗能量流动的过程中,第8年测得植物光合作用制造的有机物中的含碳量为9690 kg/(hm2.a),被初级消费者摄入的仅为2070kg/(hm2.a),还有3600 kg/(hm2.a)未被利用,则其他部分是指________中的含碳量。

 

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激素CT对破坏骨组织细胞有急性抑制作用,能减少体内钙由骨向血中的迁移量。激素PTH能促进骨质溶解,使骨骼脱钙。哺乳动物血钙含量受到激素CT和激素PTH的共同调节。某小组研究两种激素的作用,实验结果如下图。

实验材料和用具:3组大小和生理状况相同的健康大白鼠,生理盐水,生理盐水配制的适宜浓度激素CT溶液和激素PTH溶液,注射器,钙离子测定仪器等。

(1)适量地注射____可以缓解骨质疏松症,激素PTH和激素CT在调节血钙浓度方面的作用关系是 ____

(2)a、b时给3组实验大白鼠注射的物质分别是 _____________

(3)已知5%的葡萄糖溶液的渗透压与动物血浆渗透压基本相同,给正常大白鼠静脉注射一定量的15%的葡萄糖酸钙溶液,会引起大白鼠尿量____,原因是____

 

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柑橘喜温,耐寒能力较差。研究人员通过相关实验研究低温条件对柑橘的影响。实验中甲、乙两组白天均保持25℃;夜间甲组进行6℃的低温处理,乙组保持15℃。测定结果如下图曲线所示。请回答下列问题:

(1)过低的温度对柑橘光合作用影响较大,甚至引起植株死亡。主要原因是:一方面低温导致____结构受破坏,从而引起光反应生成的____减少;另一方面低温使____,从而使暗反应速率降低。

(2)甲组在实验的9天内干重变化情况是 ___(增加/减少),判断依据是________

(3)据测定,甲组柑橘叶/果实的光合产物比率明显高于乙组,导致叶的光合速率下降,推测其原因是:低温使叶的光合产物____降低,造成光合产物在叶片中积累。

 

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