Question

毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFII）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFII基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

（1）过程①中构建重组表达载体的目的是_______________________________。

（2）过程②中，成纤维细胞生长到一定阶段就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的____________，此时需用_____________处理，进行传代培养。

（3）过程③中，用___________激素处理以获得更多的卵（母）细胞。也可从活体母畜卵巢或者已屠宰母畜卵巢中采集卵（母）细胞，但需体外培养至____________期，才可将含目的基因的细胞导入。

（4）代孕母羊需用_________激素进行同期发情处理，以便为胚胎移植做准备。

Answer

使目的基因在受体细胞内稳定存在并表达 接触抑制 胰蛋白酶 促性腺 减数第二次分裂中期 孕

【解析】

分析题图，图示表示获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的流程图，其中①表示基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶和DNA连接酶；②表示动物细胞培养过程，该过程需要采用胰蛋白酶处理组织块以获得单个细胞；③表示卵母细胞的采集和培养过程；据此分析。

（1）过程①中构建重组表达载体的目的是使目的基因在受体细胞内稳定存在并表达。

（2）过程②中，成纤维细胞生长到一定阶段就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制，此时需用胰蛋白酶处理，将组织块分散成单个细胞，进行传代培养。

（3）过程③中，要得到更多的卵（母）细胞需用促性腺激素对动物进行超数排卵处理，也可从活体母畜卵巢或者已屠宰母畜卵巢中采集卵（母）细胞，但需体外培养至减数第二次分裂中期，才可将含目的基因的细胞导入。

（4）代孕母羊需用孕激素进行同期发情处理，以便为胚胎移植做准备。