Question

微生物的培养在生物科学史和现代生物工程中都是极其重要的基础技术。下图1是某学生重复艾弗里证明DNA是遗传物质实验的其中一组实验；下图2是基因工程中运用影印法将培养基A上的菌落按原来方向印在培养基B上，以检测重组质粒是否导入大肠杆菌的示意图，请据图回答下列问题。

（1）图1、图2的培养结果显示，两实验中使用的都是__________（填物理状态）培养基。

（2）在配制图2中的培养基时。除考虑营养、pH、渗透压等条件外还要考虑在培养基A和B中加入______（填“相同”或“不同）种类的抗生素。在配制含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项需要用到的是______________（填序号）。

①酒精灯      ②接种环     ③高压蒸汽灭菌锅     ④培养皿

（3）培养基灭菌是避免杂菌污染的有效途径之一。接种前还需检测灭菌效果。方法是将未接种的培养基置于恒温箱中，在适宜温度下培养一段时间，观察培养基上_______________________。

（4）实验证明，上述两项实验中R型菌和大肠杆菌的转化率都很低。为获得图1、图2所示的培养结果，一是要设法提高图1中S型菌的DNA纯度；二是要使用恰当的方法接种。两实验都不能用平板划线法和稀释涂布平板法接种，而应采用不加稀释的涂布平板法接种R型菌和大肠杆菌，理由是___________。接种培养4天后，可通过观察_________的形态特征来识别R型菌和大肠杆菌。

Answer

固体 不同 ①③④ 是否有菌落产生 平板划线法和稀释涂布平板法都可能因稀释后菌种数量极少而无法观察到转化成功的菌落 菌落

【解析】

在肺炎双球菌的转化实验中，格里菲斯的体内转化实验证明了S型菌体内存在转化因子，将R型菌转化为S型菌；艾弗里的体外转化实验证明了DNA是遗传物质，而蛋白质、糖类、脂质不是遗传物质。

（1）据图分析，两个图中的培养基上都出现了菌落，说明两个实验使用的都是固体培养基。

（2）图2中培养基A和B的作用不同，所以加入的抗生素应该不同。在配制含琼脂的培养基和倒平板的过程中，需要用到酒精灯、培养皿和高压蒸汽灭菌锅，但是不需要用接种环，故选①③④。

（3）对微生物的培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法；为了检测灭菌的效果，可以将未接种的培养基置于恒温箱中，在适宜温度下培养一段时间，观察培养基上是否有菌落产生。

（4）由于上述两项实验中R型菌和大肠杆菌的转化率都很低，为了提高转化的效果，对于图1应该设法提高S型菌的DNA的纯度；对于图2要使用恰当的方法接种。由于平板划线法和稀释涂布平板法都可能因稀释后菌种数量极少而无法观察到转化成功的菌落，所以两实验都不能用平板划线法和稀释涂布平板法接种，而应采用不加稀释的涂布平板发接种R型菌和大肠杆菌。不同的细菌形成的菌落不同，所以可以通过观察菌落的形态特征来识别R型菌和大肠杆菌。