Question

为提高大豆对磷元素的吸收能力，研究人员利用杆菌转化法将水稻的耐低磷基因OsPTF 转移到大豆植株中，下图为重组Ti质粒上T-DNA的序列结构示意图。下列相关叙述不正确的是

A. 以水稻RNA为模板通过逆转录及PCR扩增可获得大量OsPTF基因

B. RNA聚合酶与启动子I识别并结合后，启动抗除草剂基因的转录

C. 可通过含除草剂的选择培养基筛选含有目的的基因大豆愈伤组织

D. 用EcoRI、BamHI双酶切重组Ti质粒后，经电泳分离至少得到两条带

Answer

B

【解析】

基因工程的基本操作步骤主要包括四步：

①目的基因的获取，获取方法包括：从基因文库中获取、PCR扩增技术和人工合成法。

②基因表达载体的构建，是基因工程的核心步骤，基因表达载体的组成包括：启动子、目的基因、终止子和标记基因。

③将目的基因导入受体细胞，根据不同的对象采用不同的导入方法，对植物细胞可以采用农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；对于动物采用显微注射技术；对于微生物一般采用Ca2+转化法。

④目的基因的检测与鉴定，分子水平上的检测方法包括：DNA分子杂交法、分子杂交法和抗原-抗体杂交法；也可以进行个体水平上的鉴定，如抗性实验等。

以水稻RNA为模板通过逆转录可以合成cDNA，然后再以cDNA为模板利用PCR扩增可获得大量OsPTF基因，A正确；识图分析可知，抗除草剂基因位于启动子Ⅱ的后面，因此RNA聚合酶与启动子Ⅱ识别并结合后，启动抗除草剂基因的转录，B错误；由于图中T-DNA的序列中含有目的基因和抗除草剂基因，故可通过含除草剂的选择培养基筛选含有目的的基因大豆愈伤组织，C正确；用EcoRI、BamHI双酶切重组Ti质粒后，会得到三种片段：含有耐低磷基因OsPTF的片段、含有除草剂基因的片段和只含启动子I的片段，因此经电泳分离至少得到两条带，即含耐低磷基因OsPTF的片段和含有除草剂基因的片段，D正确。