Question

镰刀型细胞贫血症是一种由基因突变引起的遗传病，患者的红细胞是弯曲的镰刀状。这样的红细胞容易破裂，使人患溶血性贫血，严重时会导致死亡。某科学兴趣小组计划从血红蛋白的成分是否变化来开展研究性学习。下列是该小组成员获得纯度很高的血红蛋白的实验过程，不正确的一项是(　 　)

A. 对红细胞进行洗涤，至少洗涤三次

B. 将血红蛋白溶液装入透析袋中透析，可达到粗分离的目的

C. 在加入蒸馏水和甲苯使红细胞破裂释放出血红蛋白后，将混合液静置一段时间后分层获得血红蛋白溶液

D. 在对样品处理时，需要低速短时间离心

Answer

C

【解析】

血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：（1）样品处理：①红细胞的洗涤，洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，采集的血样要及时采用低速短时间离心分离红细胞，然后用胶头吸管吸出上层透明的黄色血浆，将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯，再加入五倍体积的生理盐水，缓慢搅拌10min，低速短时间离心，如此重复洗涤三次，直至上清液中没有黄色，表明红细胞已洗涤干净。②血红蛋白的释放，在蒸馏水和甲苯作用下，红细胞破裂释放出血红蛋白，加蒸馏水至原血液的体积。加入甲苯的目的是溶解细胞膜，有利于血红蛋白的释放和分离。（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，将搅拌好的混合溶液离心后，试管中的溶液分为4层。第一层为无色透明的甲苯层，第2层为白色薄层固体，是脂溶性物质的沉淀层，第3层是红色透明液体，这是血红蛋白的水溶液，第4层是其他杂质的暗红色沉淀物。将试管中的液体用滤纸过滤，除去脂溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的红色透明液体。②透析，透析可以去除样品中分子量较小的杂质；（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质；（4）纯度鉴定：SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

A. 红细胞洗涤过程中要加入5倍体积的生理盐水，重复洗涤三次，A正确；

B. 将透析袋放入盛有300mL的20mmol/L的磷酸缓冲液中，透析12h，可以去除样品中分子量较小的杂质，B正确；

C. 在蒸馏水和甲苯作用下，红细胞破裂释放出血红蛋白，将搅拌好的混合溶液置于离心管中，以2000r/min的转速离心10min后分层，获得血红蛋白溶液，C错误；

D. 在对样品处理时，采集的血样要及时采用低速短时间离心分离红细胞，D正确。