Question

转基因动物是指将特定的外源基因导入动物受精卵或胚胎，使之稳定整合于动物的染色体基因组并能遗传给后代的一类动物。目前培育转基因动物的方法主要有显微注射法、反转录病毒感染法等。请回答：

（1）通过显微注射法培育转基因动物是目前最常用且成功率较高的方法，大致过程包括超数排卵、受精、显微注射、胚胎移植和目的基因的表达与检测。超数排卵阶段常用__________激素对供体母畜进行处理以获得更多的卵子；显微注射前要进行冲卵，冲卵是将__________________________________从子宫冲出的操作，冲卵的生理基础是____________________

（2）通过反转录病毒感染法培育转基因动物是借助病毒将目的基因整合于宿主细胞染色体DNA上的方法。这种方法首先要获得基因表达载体，获得基因表达载体必须的工具酶是___________________________，在表达载体中目的基因插入的位置应在________________________之间；表达载体的碱基序列无法由基因表达产物推知，其原因是____________________________________________。

（3）培育转基因动物时，通常选择____________________作为受体细胞，胚胎移植前，要对母畜进行同期发情处理，其目的是_______________________________________________。

Answer

促性腺 初期（早期）胚胎 哺乳动物的早期胚胎形成后处于游离状态，未与母体子宫建立组织上的联系 限制酶 和DNA连接酶 启动子和终止子 表达载体中的部分碱基序列不能被转录（如没有启动子等） 受精卵或早期胚胎 使受体和供体处于相同的生理状况，有利于完成胚胎移植

【解析】

转基因动物中的受体细胞是受精卵，因为受精卵的全能性高，能直接发育形成新个体，为获得较多的卵母细胞，可用促性腺激素进行超数排卵，受精后通过冲卵获得早期胚胎。胚胎移植过程中的冲卵是指将早期胚胎从供体母牛的子宫中冲洗出来，冲卵的生理基础是早期胚胎形成后，处于游离状态，未与母体子宫建立组织上的联系。基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定；DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶、DNA连接酶、运载体；基因表达载体主要由目的基因、标记基因、启动子和终止子组成，标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

（1）通过显微注射法培育转基因动物是目前最常用且成功率较高的方法，大致过程包括超数排卵、受精、显微注射、胚胎移植和目的基因的表达与检测。超数排卵阶段常用促性腺激素激素对供体母畜进行处理以获得更多的卵子；显微注射前要进行冲卵，冲卵是将初期（早期）胚胎从子宫冲出的操作，冲卵的生理基础是哺乳动物的早期胚胎形成后处于游离状态，未与母体子宫建立组织上的联系。

（2）通过反转录病毒感染法培育转基因动物是借助病毒将目的基因整合于宿主细胞染色体DNA上的方法。这种方法首先要获得基因表达载体，获得基因表达载体必须的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶，在表达载体中目的基因插入的位置应在启动子和终止子之间；表达载体的碱基序列无法由基因表达产物推知，因为表达载体中的部分碱基序列可能不能被转录。

（3）培育转基因动物时，通常选择受精卵作为受体细胞，胚胎移植前，要对母畜进行同期发情处理，其目的是使受体和供体处于相同的生理状况，有利于完成胚胎移植。