Question

下表是某研究小组配制的适合尿素分解菌生长的培养基,请回答下列问题:

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4·7H2O	葡萄糖	尿素	琼脂	蒸馏水
1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15g	1000mL

(1)上述培养基的成分中，为尿素分解菌提供碳源的是____，提供氮源的是____。该培养基从物理状态上看，属于____培养基；从功能上看，属于____培养基。 

(2)当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落。此菌落来源于____________,此时______较能准确地反映样品中的活菌数。 

(3)培养过程中，常选择菌落数在______区间的平板统计计数。统计的菌落数往往比活菌的真实数目低，原因是__________________________。 

(4)尿素分解菌经X射线照射后不能正常生长，添加某种维生素后才能正常生长，原因是_______________________。 

(5)初步筛选出的产脲酶细菌，在培养基中加入酚红指示剂，能对分离的菌种做进一步鉴定，其原理是_______________________________________。

Answer

葡萄糖 尿素 固体 选择 样品稀释液中的一个活菌 平板上的菌落数 30～300 两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落 X射线照射导致尿素分解菌发生基因突变，从而缺少合成某种维生素必需的酶 产脲酶细菌分解尿素，使培养基pH升高，指示剂变红

【解析】

本题以“培养基配方”为主线，综合考查学生对培养基、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验等相关知识的识记和理解能力。

(1) 上述培养基的成分中，葡萄糖、尿素可分别为尿素分解菌提供碳源、氮源。该培养基中加入的琼脂是一种凝固剂，因此从物理状态上看，属于固体培养基；只有尿素分解菌才能在该培养基中生长，所以从功能上看，属于选择培养基。

(2) 当样品的稀释度足够高时，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成一个菌落。可见，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，此时平板上的菌落数较能准确地反映样品中的活菌数。

(3) 用稀释涂布平板法测定同一样品中的细菌数时，为了保证结果准确，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的平板进行记数，求其平均值，再通过计算得出土壤中的细菌总数。由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的真实数目低。

(4) 尿素分解菌经X射线照射后不能正常生长，添加某种维生素后才能正常生长，究其原因是：X射线照射导致尿素分解菌发生基因突变，从而缺少合成某种维生素必需的酶。

(5) 在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高，酚红指示剂将变红，因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，能对分离的菌种做进一步鉴定。