Question

鲜牛奶容易被金黄色葡萄球菌污染，该菌高度耐盐，可引起人类肺炎等疾病。在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。下图为检测鲜牛奶是否被金黄色葡萄球菌污染的操作流程，请据图回答：

(1)鲜牛奶经乳酸杆菌发酵可制成酸奶，在酸奶发酵过程中需控制的气体条件是________。

(2)用7.5% NaCl肉汤培养基培养的主要目的是_____________。经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现_________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌。从功能上分类，血平板属于____________培养基。

(3)在3个血平板上各接种稀释倍数为10³的菌液样品0.1mL，培养一段时间后平板上的菌落数分别为38、46、54，则每升原菌液样品中细菌数为________。

(4)分离纯化微生物时，除了图中接种方法，还常用平板划线法。若要在五个区域划线，共需灼烧接种环_____次，最后一次灼烧灭菌的目的是_______________________。

Answer

无氧（隔绝空气） 筛选出金黄色葡萄球菌 周围存在透明圈（无色、红色消褪） 鉴别 4.6×108 6 防止污染环境和感染操作者

【解析】试题微生物的营养物质有5类，分别是水、无机盐、碳源、氮源及生长因子；培养基按功能分为选择培养基和鉴别培养基。刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理：刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。

（1）乳酸杆菌是厌氧型微生物，因此其发酵过程中必需严格控制无氧条件。

（2）高浓度的盐溶液可以对微生物进行选择，而葡萄球菌可以生存在高浓度的盐溶液中，因此用7.5% NaCl肉汤培养基培养的主要目的是筛选出金黄色葡萄球菌；根据题意，“金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色”，所以如果经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现透明圈的菌落，说明初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌。从功能上分类，血平板属于鉴别培养基。

（3）三个培养基上平均数=（38+46+54）/3=46，所以每升水样中活菌数为46×103÷0.1÷10-3=4.6×108个。

（4）每次接种前后接种环都需要灼烧灭菌，因此若要在五个区域划线，共需灼烧接种环5次，最后一次灼烧灭菌的目的是防止污染环境和感染操作者。