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用基因工程技术生产羧酸酯酶CarE)制剂的流程如下图所示。回答下列问题: (1)...

用基因工程技术生产羧酸酯酶CarE)制剂的流程如下图所示。回答下列问题:

(1)①过程所需的酶是___________。在构建基因表达载体过程中,构建的重组质粒上启动子的本质和作用是___________

(2)实现②过程常用PCR技术,该技术的前提是要有___________,以便合成引物。为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接,需在引物的5′端加上限制性酶切位点,且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点,主要目的是___________

(3)过程③将重组表达载体导入大肠杆菌时,首先用Ca2+处理大肠杆菌,目的是___________。然后将___________溶于级缓冲液与该大肠杆菌混合,在一定温度下完成转化。

 

逆转录酶 启动子的本质是一段有特殊结构的DNA片段;作用是供RNA聚合酶的识别、结合以驱动目的基因的转录 一段已知目的基因的核苷酸序列 使DNA片段能定向插入表达载体,减少自连 使大肠杆菌处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态 重组质粒(基因表达载体) 【解析】 分析图【解析】 图中过程①表示利用mRNA通过反转录法合成相应的DNA;过程②表示利用PCR技术对目的基因进行扩增;过程③表示将目的基因导入受体细胞(大肠杆菌);过程④表示通过筛选获得工程菌。 (1)图中过程①表示利用mRNA通过反转录法合成相应的DNA的过程,需要逆转录酶的催化;基因表达载体的组成成分包括目的基因、标记基因、启动子、终止子等,其中启动子的本质是一段有特殊结构的DNA片段,其作用是供RNA聚合酶的识别、结合以驱动目的基因的转录。 (2)利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便合成引物;根据题意分析,在构建基因表达载体时,需要在引物的5′端加上限制性酶切位点,且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点,主要目的是使DNA片段能定向插入表达载体,减少自连。 (3)在将目的基因导入大肠杆菌时,需要先用钙离子处理大肠杆菌,使得大肠杆菌处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,然后将重组质粒溶于缓冲液中与该大肠杆菌混合,在一定温度下完成转化。
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考点分析:
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我国科学家屠呦呦因发现治疗疟疾的新药物青蒿素而获得2015年诺贝尔医学奖。青蒿素是—种无色针状晶体,易溶于有机溶剂,不溶于水,不易挥发,60℃以上容易分解,主要从黄花蒿中提取。近年来又发现青蒿素具有较强的抗肿瘤作用,某科研小组按如下步骤进行了相关实验:

①从黄花蒿中提取青蒿素;

②将等量癌细胞分别接种到4组培养瓶中,适宜条件下培养24h后除去上清液;

③向4组培养瓶中分别加入等量含2、4、8、16μmol/L青蒿素的培养液,适宜条件下继续培养;

④72h后统计并计算各组的细胞增殖抑制率。

回答下列问题:

(1)提取青蒿素时不宜使用水蒸气蒸馏法,原因是__________;根据青蒿素____________的特点,可采用有机溶剂萃取的方法,现有四氯化碳(沸点76.5℃)和乙醚(沸点34.5℃),应选用_________作为萃取剂,不选用另外一种的理由是 ___________________________________________________

(2)萃取青蒿素的过程应采_______加热;加热时常在加热瓶口安装回流冷凝装置,目的是____________

(3)科研小组进行上述②-④步骤实验的目的是______________。步骤③中需要设置对照组,对照组的处理方法为________________________

 

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群落演替除了定向的演替变化之外,还有非定向性的周期变化,一般分为建成、成熟、衰退、裸地这四个阶段。如图是科学家研究了以羊茅草为优势种的羊茅草原中周期性演替的过程,请结合此图,回答下列有关问题:

(1)群落演替是指:__________________________________________________

(2)从种间关系考虑,苔藓植物在建成期和成熟期生物量少,但衰退期和裸地期生长的原因是______________________

(3)草原上不同地带的演替周期常不同步,这使该草原常呈_________分布。

(4)从裸地期开始继续进行群落的演替,则此时的演替类型为 ______________

 

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家蚕和蛾的性别决定方式为ZW型,请分析回答下列问题:

(1)图为某蛾类的原始生殖细胞,其仅具有一对常染色体(C1和C2),该细胞产生的配子中染色体组合为 _________________________________

(2)某基因位于该蛾类的W染色体上,其突变型为显性,此种个体会产生具生殖能力且能发出荧光的子代。现将能发出荧光的雌蛾与不能发出荧光的雄蛾交配,其子代中能发出荧光的蛾类百分率为_____,其中性别及比例为 __________

(3)家蚕是二倍体,体细胞中有28对染色体,家蚕中e和f是两个位于Z染色体上的隐性致死基因,即ZeZe、ZfZf、ZeW,ZfW的受精卵将不能发育。为了只得到雄性后代,通过育种,需要得到Z染色体上所含基因情况是_________的雄蚕(写基因型),将该雄蚕与不带有致死基因的雌蚕交配,即可达到目的。(4)家蚕有一种三体,其6号同源染色体有三条(比正常的多一条)。三体在减数分裂联会时,3条同源染色体中的任意2条正常联会,然后分离,而另1条染色体不能配对随机地移向细胞的任何一极,而其他染色体正常配对、分离,控制蚕茧颜色的黄色基因B与白色基因b在第6号染色体上。现以正常二倍体白色茧(bb)家蚕为父本,三体黄色茧家蚕为母本(纯合体)进行杂交得到F1,再让F1的三体黄色茧家蚕与正常二倍体白色茧家蚕杂交得到F2,用遗传图解表示从F1到F2的杂交过程。__________

 

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血糖水平是调节胰岛素和胰高血糖素分泌的最重要因素,血糖平衡的意义在于为机体各种组织细胞的正常代谢活动提供能源物质。请回答下列问题:

(1)血液中胰岛素与胰高血糖素的摩尔比值在不同生理状况下是不同的,当机体处于___________状况时,该比值明显下降,此时机体物质代谢的变化是___________

(2)当血糖浓度上升时,胰岛B细胞分泌的胰岛素增加,引起靶细胞膜上的葡萄糖转运载体的数量增加,其意义是___________,从而降低血糖浓度。

(3)某糖尿病患者由胰岛B细胞损伤引起,患者血液中含有抗胰岛B细胞的抗体和效应T细胞,据此推测:该糖尿病是针对胰岛B细胞的一种___________病;胰岛B细胞的损伤是机体通过___________免疫导致的。

 

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某学校研究小组利用叶面积相等的A、B两种植物的叶片分别进行了以下两组实验(假设两组实验在相同且适宜的温度下进行,且忽略光照对呼吸作用的影响):

实验一:将A、B两种植物的叶片分别放置在相同的密闭小室中,给予充足的光照,利用红外测量仪每隔5min测定小室中的CO2浓度,结果如图1所示。

实验二:给予不同强度的光照,测定A、B两种植物叶片的CO2吸收量和CO2释放量,结果如图2所示。

请据图分析回答:

(1)实验一中固定CO2能力较强的植物是________,其固定CO2的场所为__________________;实验过程中,若突然降低光照强度,则叶绿体中ADP、C3和C5___________的量会短时间增加。

(2)实验一25~40min期间两个密闭小室内CO2含量相对稳定的原因是______________________

(3)实验二中,A、B两种植物叶片达到光饱和点之后光合速率基本不变,限制其变化的内部因素主要为_____________(写出一点即可);从实验二结果看,若单独种植A、B两种植物,种植密度过大,则净光合速率下降幅度较大的植物是_______

 

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