下列是关于血红蛋白的提取和分离实验中关键步骤,其中正确的是( )
A. 蛋白质的提取和分离一般可分为粗分离、样品处理、纯化、纯度鉴定等4步
B. 蛋白质的提取和分离实验可以以猪、牛、鸡、蛙等动物的血液为材料分离血红蛋白
C. 对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、透析和分离血红蛋白等
D. 对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
下列有关“血红蛋白提取和分离”的相关叙述中,正确的是( )
A. 用蒸馏水进行红细胞的洗涤,其目的是去除细胞表面杂蛋白
B. 将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较大的杂质
C. 血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂
D. 整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构
咪唑喹啉衍生物(BEZ)和长春花碱(VLB)用于治疗卵巢癌、肝癌等癌症,为研究二者对肾癌的治疗效果,研究人员进行了系列实验。
(1)体外培养癌细胞:培养液中补充动物血清利于更好地模拟______的成分。将肾肿瘤组织用______处理后,制成细胞悬浮液。将装有细胞悬浮液的培养瓶置于______中培养。
(2)探究BEZ和VLB单独及联合使用对肾癌细胞凋亡的影响,结果如图1所示。
该实验的自变量是______,实验结果表明______。
(3)Caspase-3是细胞内促凋亡蛋白,Mcl-1是Caspase-3基因表达的调控因子。为研究BEZ和VLB治疗肾癌的机制,研究人员对各组细胞进行实验处理24小时后,检测Mcl-1的mRNA和蛋白质含量,结果如图2。
①图2中左图与右图GAPDH内参的化学成分______(填“相同”或“不同”)。据图2推测BEZ和VLB通过______影响Mcl-1蛋白含量。
②综合图1、图2结果,在下列箭头上标明“+”或“-”(分别表示“促进”和“抑制”),图示药物发挥作用的机理。
_____________
(4)请结合上述研究,为治疗肾癌提出合理建议:______。
角膜环状皮样瘤(RDC)会影响患者视力甚至导致失明。图1为调查的某RDC家系图。
(1)此家系代代都有患者,初步判断RDC为______性遗传病。请说明致病基因不可能位于X染色体上的理由:______。
(2)研究发现RDC患者的P蛋白仅中部的第62位氨基酸由精氨酸变为组氨酸,据此推测患者P基因由于碱基对______而发生突变。
(3)Cyclin D1是细胞周期调控基因,P蛋白能结合Cyclin D1基因的启动子,调控其转录。为研究突变型P蛋白是否还有结合Cyclin D1基因启动子的功能,设计了3种DNA探针:能结合P蛋白的放射性标记探针(A)、能结合P蛋白的未标记探针(B)、未标记的无关探针(C),按图2的步骤进行实验,结果如图3。
请将图2使用探针的情况填入下表i、ii、iii处(填“不加”或“A”或“B”或“C”),完成实验方案。
分组 步骤 | 野生型P蛋白 | 突变型P蛋白 | ||||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
步骤1 | 不加 | i _____ | ii ______ | 不加 | 同i | 同ii |
步骤2 | A | A | iii ______ | A | A | 同iii |
图3结果说明突变型P蛋白仍能结合Cyclin D1基因启动子,判断的依据是______。
(4)P基因在HeLa细胞(宫颈癌细胞)中不表达。利用基因工程技术构建稳定表达野生型P基因的HeLa细胞系(甲)和稳定表达突变型P基因的HeLa细胞系(乙),培养一段时间后,检测各组细胞Cyclin D1基因表达水平,结果如图4。
实验结果说明______。
(5)综合以上研究,从分子水平解释杂合子患病的原因______。
脱落酸(ABA)有“逆境激素”之称,在植物对抗干旱等不利环境因素时起重要作用。
(1)ABA对植物的生命活动起______作用,其合成经过细胞内复杂的生物化学反应过程,需要NCED1~NCED5等酶的______作用。
(2)研究人员对水稻进行干旱胁迫4h及复水4h处理,测定叶片中ABA含量及相关基因的mRNA含量,结果如图1。
①由图1中甲图可知,干旱胁迫下,叶片ABA含量______,诱导叶片气孔______,减少水分散失。
②NCED1~NCED5基因的表达具有组织特异性,如NCED4基因主要在根中表达。
仅根据图1的结果,能否确认NCED4基因不是干旱胁迫的响应基因。请做出判断并说明理由:______。
(3)研究人员将NCED3基因作为目的基因,正向连接构建表达载体导入水稻细胞,获得转基因幼苗Ⅰ,反向连接构建表达载体(转录NCED3基因的非模板链),获得转基因水稻幼苗Ⅱ。将两种幼苗与野生型水稻幼苗一起培养,干旱胁迫处理15天后,检测植株相关生长指标及体内ABA含量,部分结果如下表和图2。
水稻 幼苗 | 处理 | 每株地上部分 干重(g) | 每株根干重(g) |
野生型 | 正常灌溉 | 0.50 | 0.12 |
干旱胁迫 | 0.41 | 0.20 |
①据表中结果阐述干旱胁迫下野生型植株形态改变的生物学意义:______。
②图2中1、2、3组ABA含量无明显差异的原因是______。
③综合上述研究,分析第6组植株ABA含量低于第4组的原因是______。
(4)干旱胁迫下,野生型植株和NCED3基因敲除突变体中NGA1蛋白含量均增加。研究人员推测NGA1蛋白是干旱环境促进NCED3基因表达的调控因子。检测______植株的NCED3基因表达量,结果为实验组低于对照组,初步支持上述推测。若要进一步验证推测,应选择的实验材料、实验组处理及预期结果包括______(填选项前的符号)。
a.NGA1基因敲除突变体 b.NCED3基因敲除突变体 c.导入含NGA1突变基因的表达载体 d.导入含NGA1基因的表达载体 e.导入空载体 f.正常供水环境 g.模拟干旱环境 h.NCED3-mRNA含量高于对照组 i.NCED3-mRNA含量低于对照组
酵母菌细胞壁的主要成分是几丁质。酿酒酵母产酒精能力强,但没有合成淀粉酶的能力;糖化酵母能合成淀粉酶,但酒精发酵能力弱。科研人员通过两种途径改良酵母菌种,实现以淀粉为底物高效生产酒精的目的。下列叙述正确的是
A. 途径Ⅰ需用纤维素酶处理酵母菌,再利用PEG诱导融合
B. 途径Ⅱ需要以淀粉酶基因作为目的基因构建表达载体
C. 途径Ⅰ和途径Ⅱ最终获得的目的酵母菌染色体数目相同
D. 以淀粉转化为还原糖的效率作为最终鉴定目的菌的指标