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样品的加入和洗脱的操作不正确的是 ( ) A. 加样前,打开色谱柱下端的流出口,...

样品的加入和洗脱的操作不正确的是           (    )

A. 加样前,打开色谱柱下端的流出口,使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面

B. 用吸管小心的将1ml透析后的样品加到色谱柱的顶端,不要破坏凝胶面

C. 加样后,打开下端出口,使样品渗入凝胶床内

D. 等样品完全进入凝胶层后,关闭下端出口

 

A 【解析】 样品加入和洗脱过程中,加样,打开色谱柱下端的流出口,使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面平齐时,关闭出口;用吸管小心的将1ml透析后的样品加到色谱柱的顶端,注意不要破坏凝胶面;加样后,打开下端出口,使样品渗入凝胶床内,等样品完全进入凝胶床后,关闭下端出口。 加样前,打开色谱柱下端的流出口,使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐(而不是下面),关闭出口。用吸管小心的将1ml透析后的样品加到色谱柱的顶端,注意不要破坏凝胶面。加样后,打开下端出口,使样品渗入凝胶床内。等样品完全进入凝胶层后,关闭下端出口,故选A。
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考点分析:
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对于凝胶色谱柱的装填哪项是错误的   (    )

A. 凝胶充分溶胀后配成凝胶悬浮液,在尼龙管打开的情况下一次性缓慢倒入色谱柱内

B. 色谱柱内一旦发现有气泡产生就必须重装

C. 装填时可轻轻敲打色谱柱,使凝胶装填均匀

D. 当凝胶表面干燥后,用300mL的物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤

 

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下列关于凝胶色谱柱的操作,正确的是(  )

A. 将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴

B. 将橡皮塞下部用刀切出凹穴

C. 插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面

D. 将尼龙网剪成与橡皮塞下部一样大小的圆片

 

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凝胶柱制作的顺序一般是

①橡皮塞打孔  ②挖凹穴  ③装玻璃管  ④盖尼龙网 ⑤盖尼龙纱  ⑥将橡皮塞插入玻璃管  ⑦接尼龙管、装螺旋夹  ⑧柱顶安装带玻璃管的橡皮塞

A. ①→③→④→⑤→⑥→⑧→⑦→② B. ①→②→③→④→⑤→⑥→⑦→⑧

C. ①→②→③→④→⑥→⑤→⑧→⑦ D. ①→②→③→⑦→⑥→⑤→⑧→④

 

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血红蛋白的提取和分离中,将搅拌好的混合液转移到离心管中,离心后,可以明显看到试管中的溶液分为4层,其中第3层是                     (    )

A. 无色透明的甲苯层 B. 脂溶性物质的沉淀层

C. 血红蛋白的水溶液 D. 其他杂质的暗红色沉淀物

 

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下列操作正确的是(    )

A. 分离红细胞时采用低速长时间离心

B. 红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水就可

C. 分离血红蛋白溶液是低速短时间离心

D. 透析时要用20mmol/L的磷酸缓冲液,透析12h

 

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