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2019年1月24日,中科院神经科学研究所的科学家经过两年努力,利用CRISPR...

2019年1月24日,中科院神经科学研究所的科学家经过两年努力,利用CRISPR/Cas9技术,成功得到五只BMAL1基因被敲除的克隆猴,可作为研究生物节律紊乱等人类疾病的动物模型。如图为体细胞核移植技术培育食蟹猴的操作过程,回答下列问题。

(1)获得食蟹猴的体细胞核移植技术的难度明显高于胚胎细胞核移植,原因___________

(2)进行过程①时,为提供成纤维细胞培养所需的无菌无毒环境,应定期更换培养基,其目的是___________

(3)过程③是利用___________法将成纤维细胞注入食蟹猴去核的减数第二次分裂中期的卵母细胞中。

(4)过程⑤的实质是早期胚胎在___________条件下空间位置的转移。胚胎移植的方法分为_______两种。

(5)CRISPR/Cas9是生物学研究中的一项革命性技术, 其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割.通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列,可人为选择DNA上的目标位点进行切割(见图)

向导RNA可在___________催化下合成。Cas9蛋白的作用是破坏DNA特定位点核苷酸之间的磷酸二酯键。将Cas9基因导入猴细胞时需要构建基因表达载体,目的是_____________

 

体细胞分化程度高,恢复其全能性较难 防止成纤维细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害 显微注射 相同生理环境 手术法和非手术法 RNA聚合酶 使目的基因在受体细胞中稳定存在,并遗传给下一代,使目的基因能表达和发挥作用 【解析】 动物细胞培养的条件为无菌、无毒,需要适宜的温度和PH,培养基中除正常的有机和无机营养外,还需加入血浆(血清)等一些天然成分;另外还需要气体条件,即加95%的空气和5%CO2,其中5%的CO2的作用是维持培养液的pH值。将细胞核导入动物细胞常用显微注射法。 (1)由于体细胞分化程度高,恢复其全能性较难,所以体细胞核移植技术的难度明显高于胚胎细胞核移植。 (2)动物细胞培养为无菌、无毒的环境,可在培养液中加入抗生素,或定期更换培养液,防止成纤维细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。 (3)由图可知,过程③是利用显微注射法将成纤维细胞注入食蟹猴去核的减数第二次分裂中期的卵母细胞中。 (4)过程⑤为胚胎移植,实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。胚胎移植的方法分为手术法和非手术法两种。 (5)RNA的形成需要RNA聚合酶的催化。构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,并遗传给下一代,使目的基因能表达和发挥作用。
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考点分析:
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将普通大麦经过一系列处理,最终可以得到麦芽汁浸出液。在麦芽汁浸出液中加入一定量蛋白胨、葡萄糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。回答下列问题:

(1)M培养基若用于某真菌的筛选,则培养基中应加入四环素以抑制_______的生长,加入了四环素的培养基属于__________培养基。

(2)M培养基为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除碳源外还有__________。碳源进入细胞后,可参与合成的生物大分子有______(答出两点即可)。

(3)从得到的上述真菌中分离、纯化某特定的酶,常用的方法是电泳法和凝胶色谱法。电泳法分离酶,影响电泳速度的因素有____________(答出两点即可)。凝胶色谱法最先分离出来的是分子量____________(填“大”或 “小”)的酶分子,原因是_______________

(4)酶的活性指酶催化一定化学反应的能力,酶反应速度指________________

 

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野生型果蝇都是灰体长翅,科学家通过各种方式培育了几十种常见的果蝇突变体,包括翅膀形状,身体颜色等等。已知果蝇的灰体和黑体、长翅和残翅各由一对常染色体上的等位基因控制,现将灰体长翅(野生型)果蝇和黑体残翅(突变型)果蝇杂交,F1都为灰体长翅,再将F1进行如下实验:

组合一:F1灰体长翅♂×黑体残翅♀→F2:灰体长翅:黑体残翅果蝇=1:1

组合二:F1灰体长翅♀×黑体残翅♂→F2:灰体长翅:灰体残翅:黑体长翅:黑体残翅=42:8:8:42

请回答问题:

1)上述两对等位基因的遗传______(遵循或不遵循)自由组合定律,判断的依据是___________

2)与组合一不同的是,组合二的子代中出现灰体残翅和黑体长翅个体,其原因是F1雌果蝇减数分裂时__________,从而能产生重组类型配子,而F1雄果蝇则不能;若将F1雌雄果蝇相互交配,子代中黑体残翅的比例是_________%

3)现发现一个黄体果蝇品系,已知该品系的出现是由某一基因发生隐性突变造成。请设计实验探究果蝇的黄体和黑体是否为同一基因突变的结果(补充实验设计思路和相应的预期实验结果)

实验思路:将黄体雄果蝇与 ________________果蝇杂交,分析子代的表现型。

结果预测:Ⅰ._____________,则果蝇的黄体和黑体是同一基因突变的结果;

Ⅱ._____________,则果蝇的黄体和黑体不是同一基因突变的结果。

 

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糖皮质激素(GC)在临床上常被用作免疫抑制剂,但长时间使用会导致体内糖皮质激素受体(GR)基因表达水平降低,GR含量较少;人参皂苷能够缓解“GC抵抗现象”,它主要存在于人参植株的根须中,但是含量较低,采用植物组织培养的方法可获取大量的人参皂苷。

(1)根据以上研究资料,某研究小组进行了以下实验研究:将体外培养的生理状态相同的人体细胞平均随机分成三组,分别加入适量且等量的生理盐水、糖皮质激素、糖皮质激素和人参皂苷,在相同环境下培养相同的时间,检测GR的含量。

该研究小组的实验课题为验证__________________________________________________

相关的预期结果及结论为______________________________________________________

(2)研究人员从人参皂苷中分离出了Rb1、Rg1、Rh1三种物质。为研究这三种物质缓解GC抵抗现象的效果,研究人员利用体外培养的人体细胞进行相关实验,结果见下表:

实验结果说明能够缓解GC抵抗现象的人参细胞提取物是_________________。Rg1可能是通过抑制GR基因表达的____________过程,使GC抵抗现象加重。

 

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选取黄瓜幼苗进行无土栽培实验,图甲为该幼苗的光合速率、呼吸速率随温度变化的曲线,同学们用图乙所示装置对该实验进行模拟测定。分析实验回答下列问题:

(1)若一天中光照12小时,黑暗12小时,则黄瓜幼苗生长的最适温度是图中的_______℃,当温度低于曲线中_________点所对应的温度时,黄瓜幼苗就不能正常生长。

(2)若图乙装置在20℃条件下,小烧杯中是NaHCO3溶液,光照强度由零逐渐增强,最终达到光饱和点,此过程中液滴的移动方向是_____________,解释其原因__________________

 

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请回答下列问题:

(1)湖面漂浮着一层“绿膜”,有人认为这是绿藻而不是蓝藻。对此,可以通过显微镜观察细胞是否具有________来判断。“绿膜”形成后,水下藻类等植物不能进行光合作用,而水生植物的呼吸作用仍在进行,导致水中的_____逐渐减少,进而导致鱼类大量死亡。如果比较该湖泊水体的pH,则早上比傍晚要_____(高/低)。

(2)夏季气温高是该湖泊“绿膜”爆发的原因之一,从本质上看这是人为污染超过了湖泊生态系统的_____________,而温度是通过影响______________来影响“绿膜”的生长。

 

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