Question

（金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物，可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色，从而形成透明圈。下图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答相关问题。

（1）7．5％NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括_________________________，用7．5％NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是____________________。

（2）操作中在血平板上的接种方法是____________，接种操作前后需要对接种工具进行_____灭菌。

（3）在制备血平板时需将pH调节至_________（“微酸性”或“微碱性”）后灭菌，待培养基______后，再加入适量血液。按培养基功能分类，血平板属于______培养基。

（4）在无菌室内，经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现__________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此，要对本操作进行完善，完善的方案是_________________________________________。

Answer

碳源、氮源、水和无机盐 增加金黄色葡萄球菌的数量 平板划线法 灼烧 微碱性 冷却 鉴别 周围存在透明圈 设置不加鲜牛奶其他操作均相同的对照组

【解析】

（1）微生物的营养物质有5类，分别是水、无机盐、碳源、氮源及生长因子。

（2）培养基按功能分为选择培养基和鉴别培养基：①选择培养基：培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物生长，培养、分离出特定的微生物（如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐）；②鉴别培养基：根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品，鉴别不同种类的微生物，如可用伊红-美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌（若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽）。

（3）接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落。

（4）刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理：刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应．当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物．当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈．这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

（1）7.5%NaCl肉汤培养基中含有蛋白质，所以可以提供氮源和碳源，又含有水分和氯化钠，所以提供的营养物质为碳源、氮源、水和无机盐；高浓度的盐溶液可以对微生物进行选择，而葡萄球菌可以生存在高浓度的盐溶液中，进而增加金黄色葡萄球菌的数量。

（2）使用接种环进行接种应该只用平板划线法；接种工具灭菌的方式是灼烧。

（3）血液是碱性的，所以培养基应该调至碱性；灭菌法方法是高压蒸汽灭菌法，所以应该等到培养基冷却后加入血液，否则会破坏血细胞；由于该培养基能够鉴别是否含有葡萄球菌，所以属于鉴别培养基。

（4）根据题意，“金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色”，所以如果经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现透明圈的菌落，说明初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌；但这个实验要这是对照实验，对照实验的设计是在培养基中不加鲜牛奶。