Question

以下是酶分离提纯的基本步骤，正确的流程顺序是

①层析提取酶蛋白 ②过滤 ③破碎细胞④沉淀酶蛋白 ⑤结晶酶蛋白

A. ③②④①⑤ B. ④③②⑤① C. ④⑤③①② D. ③②⑤④①

Answer

A

【解析】

1、酶在生物体内的存在（或分布）部位：酶是在生物体活细胞中合成的。多数酶在细胞内直接参与生物化学反应，少数的酶要分泌到细胞外发挥作用。

2、酶的制备：

（1）胞内酶的制取：如果提取存在于细胞内的酶，需要破碎生物组织细胞，可用破碎仪、研磨器或匀浆器等机械将组织细胞破碎，使酶从活细胞中释放出来，进入细胞外的溶液中，经过滤、离心制备成粗酶液。
（2）胞外酶的制备：对于唾液淀粉酶、胰蛋白酶等分泌到细胞外的酶，可以直接从动物分泌物或细胞外的组织间隙中提取。

酶的分离、纯化流程为：用物理、化学或酶解法破碎细胞→过滤获得滤液→改变pH或加入硫酸铵使酶蛋白沉淀→通过层析提纯酶蛋白→通过冷冻干燥结晶酶蛋白→酶制剂。如果提取的是胞外酶，破碎细胞的步骤可省掉，综上分析，A正确，BCD错误。

故选A。