Question

动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础,动物细胞培养在当今生物制品的生产中已越来越重要。请回答下列有关的问题:

(1)动物细胞培养的过程中为了确保无菌、无毒的环境,除了对培养液和培养用具进行无菌处理外,还可以通过_______等方式防止杂菌污染。在培养液中加入适量的NaHCO₃溶液,其作用是______。使用合成培养基时,通常要加入血清、血浆等一些天然成分,其原因是________。 

(2)动物细胞培养时,将取得的动物组织块剪碎,再用胰蛋白酶处理一段时间以获得____。对动物组织块做以上处理的原因是__________________。 

(3)单克隆抗体可以借助动物细胞的培养来生产,要培养的目的细胞是_______(填“骨髓瘤细胞”“已免疫的B淋巴细胞”或“杂交瘤细胞”),其中一种细胞经多次传代培养后不能存活,原因是___。

Answer

在培养液中添加一定量的抗生素 调节培养液的pH 血清和血浆中可能含有未知的细胞所需的物质 单个细胞 动物组织块中的细胞彼此靠在一起,限制了细胞的生长和繁殖 杂交瘤细胞 已免疫的B淋巴细胞是高度分化的细胞,不能进行细胞分裂

【解析】

动物细胞培养的过程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。

（1）动物细胞培养需要无菌、无毒的环境，除了对培养液和培养用具进行无菌处理外，还可以通过在培养液中添加一定量的抗生素等方式防止杂菌污染；在培养液中加入适量的NaHCO3溶液，可以调节培养液的pH；在使用合成培养基时通常需加入血清、血浆等天然成分，是因为血清和血浆中可能含有未知的细胞所需的物质。

（2）在动物细胞培养过程中，由于动物组织块中的细胞彼此靠在一起,限制了细胞的生长和繁殖，因此需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理剪碎的动物组织以获得单个细胞，进而制成细胞悬浮液。

（3）单克隆抗体是由杂交瘤细胞产生的，杂交瘤细胞是由已经免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成，其中已免疫的B淋巴细胞是高度分化的细胞,不能进行细胞分裂，因此其经多次传代培养后不能存活。