Question

某种产脂肪酶菌常被用作饲料添加剂。下表是从土壤中初筛该菌的培养基配方，请回答下列问题：

(1)在上述培养基中，橄榄油能为产脂肪酶菌提供___________。为增大产脂肪酶菌的浓度，需用该培养基进行富集培养，富集培养基宜选用液体培养基的原因是___________。

(2)用涂布平板法分离产脂肪酶菌时，在上述培养基的基础上，还应加入___________和溴甲酚紫(碱性条件下呈紫色，在酸性条件下为黄色)。在平板上产脂肪酶菌落的周围会出现黄色圈，原理是___________。筛选时常选择菌落大、黄色圈直径大的菌落，二者分别说明___________。

(3)菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。在平板上，有的菌落较小，呈乳白色，表面光滑，无丝状物，这些菌落可能为___________(填“细菌”或“霉菌”)。有的菌落连成一片，形成原因最可能是___________。

(4)研究发现，在饲料中添加产脂肪酶菌剂后，动物的体重明显增加，这说明___________。

Answer

碳源 液体培养基能增大菌体与培养基的接触面积，为菌株的生长和繁殖提供更多营养和空间 琼脂 脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸，脂肪酸使溴甲酚紫变为黄色 菌体繁殖能力强、脂肪酶活性高(产脂肪酶能力强) 细菌 接种菌液的浓度过高 脂肪酶菌剂能提高饲料转化率(利用率)

【解析】

据题文的描述可知：本题考查学生对微生物的纯化培养的相关知识的识记和理解能力。理清培养基的营养与类型及用途、纯化微生物时常用的接种方法——平板划线法和稀释涂布平板法的内涵及其操作流程和注意事项、常见微生物的菌落特征等相关知识是解答此题的关键。

(1) 橄榄油是本培养基中的唯一碳源，能为产脂肪酶菌提供碳源。由于液体培养基能增大菌体与培养基的接触面积，为菌株的生长和繁殖提供更多的营养和空间，所以进行富集培养时宜选用液体培养基。

(2) 用涂布平板法分离产脂肪酶菌时所用的培养基为固体培养基，所以在上述培养基的基础上，还应加入琼脂。脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸，脂肪酸呈酸性，能使溴甲酚紫变为黄色，因此在平板上产脂肪酶菌落的周围会出现黄色圈。菌落大，说明菌体繁殖能力强；黄色圈直径大，说明所产脂肪酶的活性高或产脂肪酶能力强。

(3) 菌落较小，呈乳白色，表面光滑，无丝状物，这些特征与细菌的菌落特征相符。平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。如果接种菌液的浓度过高，则会导致菌落在平板上连成一片。

(4) 在饲料中添加产脂肪酶菌剂后，因脂肪酶能催化脂肪水解，有利于脂肪的吸收，即脂肪酶菌剂能提高饲料转化率(利用率)，导致动物的体重明显增加。