Question

下图为农杆菌Ti质粒的T-DNA区段结构示意图。农杆菌附着植物细胞后，T-DNA首先在农杆菌中从右边界到左边界被剪切、复制，然后进入植物细胞并整合到染色体上，继而诱发细胞异常生长和分裂，形成植物肿瘤。以下有关叙述正确的是

A. Ti质粒存在于农杆菌的拟核DNA之外

B. 植物肿瘤的形成与A、B两个基因的表达有关

C. 清除植物肿瘤组织中的农杆菌后肿瘤不再生长

D. 利用T-DNA进行转基因时需保留LB、RB序列

Answer

ABD

【解析】

1、基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术，个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

Ti质粒是环状的DNA分子，存在于农杆菌的拟核DNA之外，A正确；A、B两个基因两个目的基因导入到受体细胞的染色体上，进行表达，继而诱发细胞异常生长和分裂，形成植物肿瘤，B正确；农杆菌将自身Ti质粒的T-DNA整合到植物染色体上，诱发了植物肿瘤的形成，故清除肿瘤组织中的农杆菌后，肿瘤仍可继续生长，C错误；只有T-DNA保留LB、RB序列，T-DNA才能在农杆菌中从右边界到左边界被剪切、复制，然后进入植物细胞并整合到染色体上，D正确；故选ABD。